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一种裸花紫珠中黄酮类成分的分析鉴定方法，其特征在于包括如下步骤：(一)样品制备：取裸花紫珠药材，加水浸泡0.5～2h，煮提1～2h，过滤，药渣再加水煮提1～2h，合并两次滤液，减压浓缩至相对密度在60℃下为1.1～1.3；准确称取2～2.5g于离心管中，加入甲醇5～10ml，混匀，超声提取0.5～2h后离心，转速为8000～10000rad/min，取上清液加入2～2.5g聚酰胺粉，水浴挥干；将挥干的聚酰胺粉置于砂芯漏斗，纯水洗涤2～4次，每次5～20ml，再用20～30％甲醇洗涤2～3次，每次5～20ml，弃去洗涤液，用70～80％甲醇分3次洗脱，前两次加入甲醇8～10ml，第三次加入甲醇3～5ml，洗脱液加入70％甲醇定容至25ml，摇匀过膜上机分析；(二)仪器条件：(1)液相色谱条件C<sub>18</sub>色谱柱；流动相为甲醇和0.1％的甲酸水溶液，梯度洗脱，所述梯度洗脱顺序为：0～2min，甲醇75％；2～47min，甲醇75％→45％；47～52min，甲醇45％→10％；52～57min，甲醇10％；57～58min，甲醇10％→75％；58～70min，甲醇75％；流速：0.2ml/min；柱温：30℃；进样体积：5μl；(2)质谱条件(I)全扫描电喷雾电离，正/负离子方式，扫描范围200－1500M，扫描时间1s，分辨率Q1＝0.7FWHM,喷雾电压4000V，以N<sub>2</sub>为夹套气的压力25psi，毛细管加热温度350℃，以N<sub>2</sub>为辅助气的压力2u，以N<sub>2</sub>为离子吹扫气的压力0u，源内CID电压0V；(II)二级质谱扫描电喷雾电离，正/负离子方式，扫描时间0.5s，分辨率Q1＝0.7FWHM,Q3＝0.7FWHM，喷雾电压4000V，以N<sub>2</sub>为夹套气的压力25psi，毛细管加热温度350℃，以N<sub>2</sub>为辅助气的压力2u，以N<sub>2</sub>为离子吹扫气的压力0u，源内CID电压0V，以Ar为碰撞气的压力1.5mTorr，碰撞能量15/30eV；(III)三级质谱扫描电喷雾电离，正/负离子方式，扫描时间0.5s，分辨率Q1＝0.7FWHM,Q3＝0.7FWHM，喷雾电压4000V，以N<sub>2</sub>为夹套气的压力25psi，毛细管加热温度350℃，以N<sub>2</sub>为辅助气的压力2u，以N<sub>2</sub>为离子吹扫气的压力0u，源内CID电压30V，以Ar为碰撞气的压力1.5mTorr，碰撞能量15/30eV；(IV)中性丢失扫描电喷雾电离，负离子方式，扫描范围350－1500M，扫描时间0.6s，分辨率Q1＝0.7FWHM,Q3＝0.7FWHM，喷雾电压4000V，以N<sub>2</sub>为夹套气的压力25psi，毛细管加热温度350℃，以N<sub>2</sub>为辅助气的压力2u，以N<sub>2</sub>为离子吹扫气的压力0u，源内CID电压0V，以Ar为碰撞气的压力1.5mTorr，碰撞能量15/30eV，中性丢失基团分子量132、146、162、176、308。 |
