一种用精胺繁殖甘蔗组培苗的方法

摘要

一种用精胺快速繁殖甘蔗组培苗的方法，将甘蔗幼叶切片作外植体，接种到MS+Spm.1.5mg·L^-1-3.0mg·L^-1的改良型MS固体培养基中，调pH 5.8-6.0，连续培养10d-25d诱导并获得甘蔗愈伤组织团块；再转移到新鲜的同一种培养基继续培养15d后，将所得愈伤组织分切成小块再转接到新鲜的同一种培养基。继续培养20d至30d，将再生苗转移到新鲜的同一种培养基培养20d，得到株高5-6cm、根苗齐全的试管苗。本发明从外植体培养启动到完整再生植株的建成，只用1种培养基，显著简化了甘蔗组培苗的生产程序，同时摆脱了2,4-D诱导愈伤组织的毒害作用，使用的精胺价格低廉，更利于推广。

主权项

一种用精胺繁殖甘蔗组培苗的方法，其特征是包括如下步骤：⑴以常规方法获得的甘蔗幼叶切片作外植体，常规消毒，接种到MS+Spm.1.5mg·L^‑1‑3.0mg·L^‑1的改良型MS固体培养基中，调pH 5.8‑6.0；在常规培养条件下连续培养10d‑25d诱导并获得甘蔗愈伤组织团块；⑵将上述愈伤组织团块小心地转移到新鲜的MS+Spm.1.5mg·L^‑1‑3.0mg·L^‑1培养基，在常规培养条件下继续培养15d，陆续有形态各异胚状体发生；⑶将上述已经分化出胚状体的愈伤组织团块分切成黄豆大小的小块转接到新鲜的MS+Spm.1.5mg·L^‑1‑3.0mg·L^‑1培养基；每瓶接种5个小块；每批接种10瓶以上，在常规培养条件下继续培养20d和30d，在此过程中，原有胚状体陆续萌发成苗的同时，愈伤组织小块也会继续长大，并有新的胚状体形成和萌发成苗；⑷将株高达2cm的再生苗统一选出转移到新鲜的MS+Spm.1.5mg·L^‑1‑3.0mg·L^‑1培养基；每瓶15株；常规培养20d，便得到株高5‑6cm、根苗齐全的试管苗；⑸按照常规炼苗，出瓶，洗苗分株，移栽至装有育苗基质的育苗杯或育苗床中，常规管理，成活率≥90％。