| 主权项 |
由生物组织产生生物基质支架的方法，所述生物基质支架用于工业规模分散至培养装置上，所述方法包括：a)以包含约3.5M NaCl至约4.5M NaCl的盐浓度的缓冲液灌注所述生物组织或使所述生物组织均质化；然后b)在第一培养液中以包含脂肪酶和/或去污剂的脱脂缓冲液灌注步骤(a)的生物组织或提取步骤(a)的匀浆，其中所述第一培养液的重量摩尔渗透压浓度是约250mOsm/kg至约350mOsm/kg，并且所述第一培养液是无血清的且处于中性pH；然后c)用处于中性pH且包含约2.0M NaCl至约5.0M NaCl的盐浓度的缓冲液灌注步骤(b)的组织或提取步骤(b)的匀浆，选择所述浓度以保持所述生物组织中鉴定的胶原不溶；然后d)在缓冲液中用RNase和DNase灌注步骤(c)的组织或提取步骤(c)的匀浆；以及然后e)用处于中性pH、无血清、且具有约250mOsm/kg至约350mOsm/kg的重量摩尔渗透压浓度的第二培养液冲洗步骤(d)的组织或匀浆，进而从所述生物组织产生完整的或均质化的生物基质支架，所述生物基质支架包含所述生物组织的至少95%的胶原和大部分胶原结合基质成分以及基质结合生长因子、激素和细胞因子；f)在基础培养液中稀释所述生物基质支架；g)在约‑80℃冷冻(f)的生物基质支架；h)通过低温研磨将(g)的生物基质支架粉碎为约1μm至约100μm大小范围的生物基质颗粒；i)在基础培养液中悬浮解冻(h)的生物基质颗粒；以及j)将步骤(i)的生物基质颗粒分散至培养装置上，进而从生物组织产生生物基质支架，所述生物基质支架用于工业规模分散至培养装置上。 |
