发明名称 |
一种利用实时荧光定量PCR进行谷子锈病早期诊断的技术 |
摘要 |
本发明涉及一种通过实时荧光定量PCR检测谷子叶片中锈菌(<i>Uromyces setariae-italicae</i>)含量的方法,是在谷子接种锈菌0h,6h,18h,30h,36h,42h,72h后采集谷子叶片样本;将各时间点采集的叶片样本提取总DNA,根据锈菌核糖体ITS序列设计特异性引物,通过实时荧光定量PCR,利用特异性引物,对锈菌进行定量分析,测定锈菌在谷子叶片接种后组织内的DNA随时间的变化规律。本发明建立了精确度高、特异性强、灵敏度高的谷子锈菌荧光定量PCR检测方法,进而为锈菌的致病机制、分子生物学研究等奠定了基础。<b /> |
申请公布号 |
CN103981264B |
申请公布日期 |
2016.06.29 |
申请号 |
CN201410204435.8 |
申请日期 |
2014.05.15 |
申请人 |
董志平 |
发明人 |
李志勇;王楠;董志平;白辉;董立;马继芳;全建章;刘磊 |
分类号 |
C12Q1/68(2006.01)I;C12Q1/04(2006.01)I;C12R1/645(2006.01)N |
主分类号 |
C12Q1/68(2006.01)I |
代理机构 |
|
代理人 |
|
主权项 |
一种通过实时荧光定量PCR对谷子叶片中的锈菌进行早期诊断的方法,其特征在于:利用real‑time fluorescence quantitative PCR反应的特异性引物,分别命名为rustf和rustr:rustf GGTGCACTTAATTGTGGCTCAArustr CTCCTTTTCTTTTTCCCTCTCAAA通过DNA 结合SYBR Green I染料法,以提取的谷子叶片总DNA为模板进行扩增反应,若能够扩增出145bp的核苷酸片段,则该谷子已经感染了谷子锈病。 |
地址 |
050035 河北省石家庄市东开发区恒山街162号谷子所 |