一种基于肽核酸探针的酪蛋白激酶-1基因突变检测试剂及应用

摘要

本发明公开了一种基于肽核酸探针的酪蛋白激酶-1（CK1）基因突变检测试剂、PCR检测方法及应用，属于基础生物研究及生物检测技术领域。检测试剂包括引物、肽核酸荧光探针及野生型互补的肽核酸序列，正向引物如序列表中SEQ ID NO.1、NO.3；反向引物如序列表中SEQ ID NO.2、NO.4；肽核酸荧光探针如序列表中SEQ ID NO.5、NO.6；野生型互补肽核酸序列如序列表中SEQ ID NO.7、NO.8。本发明从转录水平能快速发现Wnt信号通路中CK1基因突变情况，具有特异性强、灵敏度高等显著优点，为抗癌药物筛选，新靶向药物探讨、基础科学研究提供工具。

主权项

一种用于酪蛋白激酶‑1CK1基因突变检测的试剂，其特征在于，包括用于阻断野生型CK1基因扩增的野生型PNA序列、用于特异性扩增G72D、F101L突变型CK1基因序列的一组引物对及突变型PNA荧光探针：所述检测CK1基因G72D突变正向引物如序列表中SEQ ID NO.1；所述检测CK1基因G72D突变反向引物如序列表中SEQ ID NO.2；所述检测CK1基因F101L突变正向引物如序列表中SEQ ID NO.3；所述检测CK1基因F101L突变反向引物如序列表中SEQ ID NO.4；所述检测CK1基因G72D突变PNA荧光探针如序列表中SEQ ID NO.5；所述检测CK1基因F101L突变PNA荧光探针如序列表中SEQ ID NO.6；所述特异性结合包含CK1基因72密码子野生型PNA序列如序列表中SEQ ID NO.7；所述特异性结合包含CK1基因101密码子野生型PNA序列如序列表中SEQ ID NO.8；修饰所述5'端的所述荧光报告基团为：FAM、HEX、TET、JOE、VIC、ROX、Cy3或Cy5，修饰所述3'端的淬灭基团为：TAMRA、Eclipse、BHQ1、BHQ2、BHQ3或DABCYL。