一种肝素钠的制备方法

摘要

本发明涉及一种肝素钠的制备方法，属于生物制药领域。本发明针对目前在制备肝素钠生产硬件设施投入较大，生产成本较高，同时在提取过程中肝素钠损失大的问题，本发明通过以牛肝为原料，通过酶解，超声辅助提取，再使用白土脱色及硫酸铵除杂，醇析制备粗肝素钠，然后通过牛血中超氧化物歧化酶等酶对粗肝素钠进一步处理，进行纯化，最后通过树脂吸附，脱吸附及干燥，制得肝素钠，本发明制备的肝素钠成本低，纯度高，提取率高。

主权项

一种肝素钠的制备方法，其特征在于具体制备步骤为：（1）称取新鲜牛肝放入搅碎机中将其粉碎成浆状物，再将浆状物与复合风味蛋白酶按质量比7:1，混合均匀，放入容器中，向容器中加入质量分数为1.5％的鞣花酸溶液，加入量为混合物质量的70～75％，使用质量分数为10％的盐酸调节pH至6.0～6.5，将容器移至超声振荡器中，在23～25KHz下振荡2～3h；（2）在上述振荡结束后，将容器内的混合物放入搅拌器中，在6000r/min搅拌30～40min后过滤，收集过滤液，再按固液比1:9，将100目白土和过滤液搅拌均匀，随后向其中加入硫酸铵搅拌直至无沉淀产生后过滤，收集过滤液，再向过滤液中加入无水乙醇直至无沉淀产生，过滤收集沉淀物，得粗肝素钠，备用；（3）收集牛血，将其与质量分数为20％的双氧水按体积比4:1，混合均匀，再向混合物中加入牛血质量5～7％的蛋白酶及牛血质量8～9％的磷脂酶，在35℃下以150r/min搅拌酶解3～5h，随后将酶解混合物放入离心机中，以9000～12000r/min离心分离5～10min，收集上清液，得处理液；（4）按固液比1:3，将备用的粗肝素钠与上述所得的处理液混合均匀，以120r/min 搅拌5～8h，随后再向其中加入粗肝素钠等质量的D208树脂，搅拌30min后过滤收集过滤物，随后将过滤物按固液比1:2与质量分数为8％的氯化钠溶液搅拌脱吸附1～2h后过滤，收集过滤液放置于4℃下静置30min，再过滤，将过滤液进行喷雾干燥，收集干燥物，即可得到肝素钠。