一种叶酸巯基化衍生物的制备方法

摘要

本发明公开了一种叶酸巯基化衍生物的制备方法。本发明将硫醇中的-SH保护得到其衍生物，从而实现对具有高反应活性的巯基的保护；然后在催化剂和脱水剂的存在下，被保护的硫醇衍生物上的羟基与叶酸发生酯化反应，得到改性后的叶酸衍生物；该叶酸衍生物中的碳硫键通过还原反应而断裂，产物中重新形成巯基，从而得到目标产物巯基化叶酸。本发明采用三苯基甲醇进行替代三苯甲基氯，克服了产物分离困难以及产品收率较低的弊端，提高了产品收率。在酯化反应中，本发明采用固体催化剂(大孔阳离子交换树脂)，使产物分离效率大大提高，而普通生物制备中采用4-二甲氨基吡啶(DMAP)等小分子，易溶于溶剂，很难分离。

主权项

一种叶酸巯基化衍生物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：1)巯基的保护将巯基醇类化合物溶于有机溶剂中，控制温度20～40℃，加入适量的NaOH，搅拌30min，然后加入三苯基甲醇，反应6‑12h；反应结束，将反应液减压蒸馏；用有机溶剂溶解减压蒸馏后的产物，用水抽提3次，最后用干燥剂干燥有机相；再次蒸除溶剂，保护后的巯基衍生物粗产品用丙酮重结晶；2)保护后的巯基衍生物与叶酸的反应将叶酸溶于溶剂中，加入脱水剂和阳离子交换树脂催化剂，再加入所述保护后的巯基衍生物，氮气保护下搅拌反应8～12小时，离心，保留上清液，将其加入到无水乙醇中析出沉淀，再离心，离心条件2000～10000rpm，时间5～20min，并将沉淀用蒸馏水洗涤、离心三次，得到的沉淀放入真空干燥箱中干燥，温度设为15～50℃，最后得到含巯基的叶酸衍生物；采用的脱水剂为无水硫酸钠或N，N′‑二环己基碳二亚胺；所述的催化剂为苯乙烯系阳离子交换树脂，脱水剂和催化剂两者配合使用；叶酸、脱水剂、巯基衍生物的摩尔比为1∶(0.5～10)∶(1～4)；3)叶酸衍生物中巯基的脱保护将三乙基硅烷、三氟乙酸混合，然后加入所述含巯基的叶酸衍生物，搅拌30min，将其滴加至乙醚中，充分搅拌，析出黄色沉淀，离心得到沉淀，沉淀洗涤三次，真空干燥；将真空干燥得到的样品，再重复以上操作一次，即得产品。