一种合成桑黄高活性黄酮类化合物的方法

摘要

本发明属于生物发酵工程技术领域，具体涉及一种合成桑黄高活性黄酮类化合物的方法，主要是对其培养基进行了优化，在培养基中添加了香豆素、苯丙氨酸等物质，再通过(1)一级种子的培养、(2)二级种子培养、(3)发酵培养、(4)提取桑黄活性黄酮类化合物四个步骤，大大提高了桑黄的黄酮类化合物产量，也保持了其生物活性。运用本发明可以同时获得高产量和高抗氧化活性的桑黄黄酮类化合物，含量高，活性稳定，生产周期短，污染少，成本低廉，是一种极具有工业化前景的生产方法。

主权项

一种合成桑黄高活性黄酮类化合物的方法，其特征在于由下述步骤组成：(1)一级种子的培养将斜面保藏的活化好的桑黄菌种接种到种子培养基中进行一级种子培养，接种量是每100ml的种子培养基中接入4～5块大小为5mm×5mm的菌块，培养温度为27～30℃，转速为150～180r/min，培养时间为7～9天；上述的1L种子培养基中：葡萄糖为15.0～22.0g、土豆为150.0～220.0g、KH₂PO₄为0.5～2.5g、MgSO₄为0.2～0.5g，加水至1L,该种子培养基的pH为6.5；(2)二级种子的培养将步骤(1)中的培养好的一级种子接到种子培养基中进行二级种子培养，接种量为5～15(V/V)％，培养温度为27～30℃，转速为150～180r/min，培养时间为7～9天，得到二级种子；(3)发酵培养将步骤(2)的培养好的二级种子接到发酵培养基中，接种量为5～15(V/V)％，培养温度为27～30℃，转速为150～180r/min，培养4～5天向发酵培养基中加入D‑101大孔树脂，继续培养3～4天；1L发酵培养基中：葡萄糖为15.0～22.0g、蛋白胨为2.0～7.0g、香豆素为0.02～0.06g、苯丙氨酸为0.2～0.6g、吐温‑80为1.0～4.0g、肉桂酸0.05～0.5g、MgSO₄为1.0～5.0g、KH₂PO₄为0.5～3.0g，加水至1L，该发酵培养基的pH为6.5；(4)提取桑黄活性黄酮类化合物在步骤(3)的发酵培养完成后过滤出D‑101大孔树脂，利用D‑101大孔树脂将发酵培养基中生成的黄酮类化合物吸附出来，用80％的甲醇洗脱出来，得到桑黄活性黄酮类化合物。