一种利用海螺消化腺酶解紫菜获得体细胞的方法

摘要

本发明公开了一种利用海螺消化腺酶解紫菜获得体细胞的方法，其是将新鲜海螺的消化腺经匀浆、盐析后直接作为酶液，对紫菜组织进行酶解获得所需体细胞。按本发明方法进行处理，可简化操作，缩短酶解时间，且酶解效果好，酶解过程中无需加入纤维素酶等其他酶，可有效降低成本，具有较好经济效益，适合产业化生产推广。

主权项

一种利用海螺消化腺酶解紫菜获得体细胞的方法，其特征在于：包括以下步骤：1）取新鲜海螺的消化腺，用水漂洗2次后，放入匀浆机中进行匀浆，然后将其溶解在pH值为7.0、浓度为0.1mol/L的磷酸盐缓冲液中；2）在步骤1）所得溶液中加入硫酸铵，使溶液中硫酸铵的饱和度为30%进行盐析，于4℃透析过夜，然后于1000r/min离心15min后，取上清液加硫酸铵至饱和度为90%进行二次盐析，经透析、离心后取沉淀；3）将步骤2）所得沉淀加水配制成浓度为0.2‑0.3μg/mL的酶液；4）将紫菜组织剪碎，按1‑2mL/g的量加入酶液，于10℃、80r/min摇床上酶解处理2‑3h，然后用100μm筛绢过滤去除未酶解的组织碎片，2500 r /min离心5min，收集游离的体细胞。