一种用于快速检测的胶体金共价标记方法

摘要

本发明提供免疫检测用纳米胶体金的标记方法，包括以下步骤：以柠檬酸钠还原法制备小粒径的纳米金颗粒，以小粒径的纳米金颗粒为种子金，缓慢匀速滴加氯金酸和弱还原剂，制备大粒径的胶体金颗粒，将待标记的抗体或蛋白用Traut’s试剂处理以便于和所制备的胶体金偶联结合；或者，以小粒径的纳米金颗粒为种子金，缓慢匀速滴加氯金酸和含巯基的羧酸还原剂，制备表面带羧基的大粒径胶体金颗粒，将胶体金颗粒用交联剂活化得到功能化的胶体金颗粒，将抗体或蛋白与制备的胶体金颗粒偶联结合，形成金标记抗体蛋白复合物。本发明提高了金标复合物在复杂介质中的稳定性，对目标蛋白的选择性识别显著增强，从而相对提高了金标试纸条的灵敏度。

主权项

免疫检测用纳米胶体金的共价标记方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、采用柠檬酸钠还原法制备小粒径的纳米胶体金；S2、以小粒径的纳米金颗粒为种子金，缓慢匀速滴加氯金酸和含巯基的羧酸还原剂，通过逐步生长的方法制备表面带羧基的大粒径胶体金颗粒，将制备好的胶体金颗粒用交联剂活化得到功能化的胶体金颗粒；S3、通过条件摸索最佳量的标记抗体蛋白，加入待标记抗体或蛋白于胶体金溶液中，离心并用缓冲液重悬，形成金标记抗体蛋白复合物；S4、将共价结合的金标抗体蛋白复合物涂匀在玻璃纤维纸上，干燥而成金标垫组装成试剂条；所述S2中，所述含巯基的羧酸还原剂采用巯基丁二酸、巯基丙酸和巯基乙酸中至少一种。