发明名称 |
提高S-腺苷-L-半胱氨酸水解酶免疫原性的方法及六糖修饰ahcy蛋白 |
摘要 |
提高S-腺苷-L-半胱氨酸水解酶免疫原性的方法及六糖修饰ahcy蛋白,涉及蛋白免疫原性领域,其目的是为了给布鲁氏菌提供更好的疫苗候选抗原。该方法为:4℃将六糖与高碘酸钠按摩尔比1:1混合在pH 6.0的PBS中反应1h;室温将EDC与NHS按摩尔比1:1加入上述体系中反应6h;室温将ahcy蛋白按ahcy蛋白与六糖摩尔比1:1000加入上述体系中过夜反应;4℃在50mmol/L、pH8.0~9.6的碳酸盐溶液中透析5h,再在50mmol/L、pH7.0~8.0的PBS中透析一天。获得的六糖修饰ahcy蛋白的刺激增殖指数、抗体效价、刺激小鼠脾淋巴细胞后产生的IFN-γ和IL-2的量都大大提高。 |
申请公布号 |
CN105671016A |
申请公布日期 |
2016.06.15 |
申请号 |
CN201610115975.8 |
申请日期 |
2016.03.02 |
申请人 |
吉林农业大学 |
发明人 |
王秀然;许春晓;卢天成;王晓龙;王浩;王岩;李海燕;李校堃;孙喆;李晓薇;孙天旭;王法微;杨晶;王艳芳;刘秀明;付玉芹 |
分类号 |
C12N9/14(2006.01)I;A61K39/10(2006.01)I;A61P31/04(2006.01)I |
主分类号 |
C12N9/14(2006.01)I |
代理机构 |
长春菁华专利商标代理事务所 22210 |
代理人 |
于晓庆 |
主权项 |
提高S‑腺苷‑L‑半胱氨酸水解酶免疫原性的方法,其特征在于,包括以下步骤:步骤一、4℃下,将六糖与高碘酸钠按摩尔比为1:1的比例混合,在pH 6.0的PBS中反应1h;步骤二、室温下,按EDC与NHS的摩尔比为1:1的比例,向步骤一所得反应体系中加入EDC和NHS,反应6h;步骤三、室温下,按ahcy蛋白与六糖的摩尔比为1:1000的比例,向步骤二所得反应体系中加入ahcy蛋白,过夜反应;步骤四、4℃下,在50mmol/L、pH8.0~9.6的碳酸盐溶液中透析5h;步骤五、4℃下,在50mmol/L、pH7.0~8.0的PBS中透析一天。 |
地址 |
130118 吉林省长春市净月开发区新城大街2888号 |