发明名称 |
转移因子溶液及其制剂中游离氨基酸含量的高效液相色谱检测方法 |
摘要 |
本发明提供一种转移因子溶液及其制剂中游离氨基酸含量的高效液相色谱检测方法:精密量取衍生后的供试品溶液注入液相色谱仪,以0.1mol/L醋酸钠缓冲溶液为流动相A,以甲醇-乙腈-水为流动相B,利用流动相A-流动相B进行梯度洗脱,记录色谱图,从标准曲线回归方程中求出供试品中游离氨基酸含量。通过筛选流动相组成,使液相色谱图中各氨基酸峰峰形好,分离度高,大大降低了相邻组分峰间的重叠比例,提高了检测准确度,适用于转移因子溶液及其相关制剂中的游离氨基酸的检测,以便对转移因子的生产及其制剂实施有效的监督控制。 |
申请公布号 |
CN104897832B |
申请公布日期 |
2016.06.15 |
申请号 |
CN201510246537.0 |
申请日期 |
2015.05.14 |
申请人 |
金花企业(集团)股份有限公司西安金花制药厂 |
发明人 |
陶玉 |
分类号 |
G01N30/88(2006.01)I |
主分类号 |
G01N30/88(2006.01)I |
代理机构 |
西安通大专利代理有限责任公司 61200 |
代理人 |
徐文权 |
主权项 |
一种转移因子溶液及其制剂中游离氨基酸含量的高效液相色谱检测方法,其特征在于:包括以下步骤:1)制备供试品溶液;2)供试品溶液的衍生精密量取所述供试品溶液2.0mL,并置于具塞试管中;然后向所述具塞试管中加入0.1mol/L异硫氰酸苯酯乙腈溶液0.8~1.0mL以及1mol/L三乙胺乙腈溶液0.4~0.6mL并摇匀,然后于室温下反应1~2小时,反应结束后用正己烷萃取,取萃取得到的下层溶液用滤膜过滤,收集滤液,得衍生后的供试品溶液;3)测定精密量取衍生后的供试品溶液,并注入高效液相色谱仪,所述高效液相色谱仪的色谱柱填充剂采用十八烷基硅烷键合硅胶;以0.05~0.1mol/L醋酸钠缓冲溶液为流动相A,以甲醇、乙腈和水的混合液为流动相B,所述流动相A的pH值为6.0~6.5;所述流动相B中甲醇:乙腈:水的体积比为(15~25):(55~65):(15~25);利用流动相A与流动相B进行梯度洗脱,记录色谱图,根据标准曲线回归方程求出供试品中游离氨基酸含量,所述梯度洗脱中流动相A与流动相B的体积比为:0min时为97:3,15min时为88:12,20min时为85:15,50min时为50:50,50.1min时为0:100,55min时为0:100,56min时为97:3,70min时为97:3。 |
地址 |
710065 陕西省西安市高新技术产业开发区科技四路202号 |