发明名称 一种评价硫酸盐还原菌抑制效果的方法
摘要 本发明涉及一种评价硫酸盐还原菌抑制效果的方法;从测试液/培养液瓶中取出体积为V<sub>b</sub>的测试液/培养液废弃掉;注入用含硫酸盐还原菌的污水配制的抑制药剂/杀菌剂,体积为V<sub>b</sub>或V<sub>n</sub>;注入污水体积为(V<sub>b</sub>-V<sub>n</sub>);放入培养箱,30℃恒温培养,每24h观察结果;每隔24h小剂量、小体积地补充注入用清水配制的该抑制药剂/杀菌剂,以液体总体积不超过瓶子的总体积为限,30℃恒温培养,每24h观察结果,以铁钉是否变黑,瓶内液体是否变黑或产生明显的黑色沉淀物、几天变黑来评价该抑制配方对该水样中的硫酸盐还原菌的抑制效果;本方法缩短了测试周期,减少了抑制剂/杀菌剂的用量和测试瓶的消耗,测试结果更为直观。
申请公布号 CN103901024B 申请公布日期 2016.06.08
申请号 CN201210579145.2 申请日期 2012.12.27
申请人 中国石油天然气股份有限公司 发明人 聂春梅;陈爱华;方新湘;李敏香;赵燕;王传萍
分类号 G01N21/78(2006.01)I;G01N21/82(2006.01)I 主分类号 G01N21/78(2006.01)I
代理机构 北京华沛德权律师事务所 11302 代理人 刘杰
主权项 一种评价硫酸盐还原菌抑制效果的方法,其特征在于,以市售的硫酸盐还原菌测试瓶或者自行配制的硫酸盐还原菌培养基为反应场所,以硫酸盐还原菌为抑制对象,以生物抑制剂、化学杀菌剂或生物‑化学复配抑制剂为评价对象,评价硫酸盐还原菌的抑制效果的方法包括以下步骤:1)取样:从油田、矿场及其他存在硫酸盐还原菌危害的环境中取样或制备成含有硫酸盐还原菌的污水样;2)配药:依据污水样中硫酸盐还原菌的含量,利用该污水样配制相同浓度、不同种类的抑制剂/杀菌剂,并依次编号为1<sub>#</sub>、2<sub>#</sub>~N<sub>#</sub>;或者配制浓度为C的同种抑制剂/杀菌剂溶液,考察其在不同浓度C<sub>1</sub>、C<sub>2</sub>……C<sub>n</sub>下的抑制/杀灭效果;3)编号:对应于N种抑制剂/杀菌剂或同一抑制剂/杀菌剂的N种不同浓度,取N个硫酸盐还原菌测试瓶,依次编号为1、2……N;并同时做空白对照,空白硫酸盐还原菌测试瓶编号为1′、2′…...N′;4)比例调配:每只硫酸盐还原菌测试瓶中的原装测试液体积为Va,废弃测试液体积为V<sub>b</sub>,V<sub>b</sub>是依据抑制剂/杀菌剂发挥药效的终浓度计算而得,且V<sub>b</sub>:V<sub>a</sub>为0.1~0.9,分别从测试液体积为V<sub>a</sub>的2N个硫酸盐还原菌测试瓶中均吸取体积为V<sub>b</sub>的测试液废弃处理,此时2N个硫酸盐还原菌测试瓶中的测试液体积均为(V<sub>a</sub>‑V<sub>b</sub>);5)注药:加药方式可根据需要选择一次性加入或连续加入方式;一次性加入方式:吸取体积为V<sub>b</sub>/V<sub>1</sub>的1<sub>#</sub>抑制剂/杀菌剂,注入编号为1的硫酸盐还原菌测试瓶中,若评价同一药剂在不同浓度下的抑制效果,则再用另一支一次性注射器吸取体积为(V<sub>b</sub>‑V<sub>1</sub>)的污水也注入编号为1的硫酸盐还原菌测试瓶中,其中,V<sub>n</sub>=C<sub>n</sub>.V<sub>a</sub>/C(V<sub>n</sub>∈(V<sub>a</sub>‑V<sub>b</sub>));同时吸取体积为V<sub>b</sub>的污水样,注入编号为1′的空白硫酸盐还原菌测试瓶中;吸取体积为V<sub>b</sub>的2<sub>#</sub>抑制剂/杀菌剂,注入编号为2的硫酸盐还原菌测试瓶中,若评价同一药剂在不同浓度下的抑制效果,则再用另一支一次性注射器吸取体积为(V<sub>b</sub>‑V<sub>2</sub>)的污水也注入编号为2的硫酸盐还原菌测试瓶中,同时吸取体积为V<sub>b</sub>的污水样,注入编号为2′的空白硫酸盐还原菌测试瓶中;…...以此类推,直至需要的硫酸盐还原菌测试瓶均注射完毕,此时硫酸盐还原菌测试瓶中的最终抑制剂/杀菌剂浓度即为所考察的浓度,污水中的硫酸盐还原菌数量均按比例进行了稀释,其中,V<sub>1</sub>、V<sub>2</sub>、V<sub>n</sub>为吸取体积;连续加入方式:若是不同种类药剂的评选,即在一次性加入的基础上,每隔24h,用一次性注射器分别吸取编号为1<sub>#</sub>、2<sub>#</sub>~N<sub>#</sub>的抑制剂/杀菌剂,对应编号为1、2…...N的硫酸盐还原菌测试瓶,分别补充注入适量的的抑制剂/杀菌剂;若是同种药剂在不同浓度下的评选,即在一次性加入的基础上,每隔24h,用一次性注射器吸取浓度为C的抑制剂/杀菌剂,对应编号为1、2…...N的硫酸盐还原菌测试瓶,分别补充注入适量的抑制剂/杀菌剂;补充注入药剂体积与硫酸盐还原菌测试瓶原装药液体积比为0.01~0.05;连续7天,若3天内观察到铁钉变黑/瓶内液体变黑/产生明显的黑色沉淀物,则停止补加,说明所述补充注入药剂体积与硫酸盐还原菌测试瓶原装药液体积比为0.01~0.05后的反应环境不能在0~24h内将污水中的SRB控制在0~5mg/l;6)培养、观察:将注入好的硫酸盐还原菌测试瓶均放入恒温箱中恒温至30℃培养,每24h观察一次,以铁钉是否变黑,瓶内液体是否变黑或产生明显的黑色沉淀物、几天变黑来评价所述抑制剂/杀菌剂对该水样中的硫酸盐还原菌的抑制效果。
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