发明名称 |
一种非洲猪瘟P30蛋白重组杆状病毒表达载体及其制备方法 |
摘要 |
本发明提供了一种非洲猪瘟P30蛋白重组杆状病毒表达载体及其制备方法,其是从含ASFVP30全长基因的质粒PCR-4TOPO-P30中扩增出P30基因,将扩增的P30基因连接至杆状病毒载体pFastBac 1中,构建重组杆状病毒载体pFastBac1-ASFV-P30,转化至大肠杆菌感受态细胞DH10Bac中,获得重组穿梭杆粒rBacmid-ASFV-P30,鉴定正确后将其转染至Sf 9昆虫细胞,获得重组杆状病毒,并将重组杆状病毒进行传代扩增,将高滴度的含有ASFV P30基因的杆状病毒接到High Five昆虫细胞中进行ASFV P30蛋白的真核表达。选用本发明方法构建非洲猪瘟P30蛋白重组杆状病毒表达载体,并利用重组杆状病毒表达系统在昆虫细胞中表达非洲猪瘟P30蛋白,为非洲猪瘟血清学ELISA检测方法的建立奠定了基础。 |
申请公布号 |
CN105647971A |
申请公布日期 |
2016.06.08 |
申请号 |
CN201610118546.6 |
申请日期 |
2016.03.02 |
申请人 |
青岛农业大学 |
发明人 |
单虎;王玉英;于泽坤;秦志华;张洪亮;黄娟 |
分类号 |
C12N15/866(2006.01)I;C12N15/66(2006.01)I |
主分类号 |
C12N15/866(2006.01)I |
代理机构 |
|
代理人 |
|
主权项 |
一种非洲猪瘟P30蛋白重组杆状病毒表达载体,其特征在于该重组杆状病毒表达载体的核苷酸序列为SEQ ID NO:2。 |
地址 |
266109 山东省青岛市城阳区长城路700号 |