一种鲨鱼鱼肉高F值寡肽的制备方法

摘要

本发明公开了一种鲨鱼鱼肉高F值寡肽的制备方法。本发明以鲨鱼鱼肉为原料，通过超声提取鲨鱼鱼肉醇溶蛋白、碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶双酶酶解，利用的超滤分级、活性炭吸附纯化和大孔树脂精制得鲨鱼鱼肉高F值寡肽，该F值为35.2～39.6，分子量为630～720 Da；该高F值寡肽具有显著的抗疲劳效果，可以作为抗疲劳功能食品或保健食品进行开发。

主权项

一种鲨鱼鱼肉高F值寡肽的制备方法，其特征在于包括以下步骤：1）鲨鱼鱼肉醇溶蛋白的制备：取鲨鱼鱼肉按1 g:15 mL～1 g:20 mL固液比加入90% ～95%的乙醇溶液，用高速组织捣碎机将其制成匀浆，在25～30℃、功率650～700 W超声提取150 min ~ 180 min；将提取液的pH值用1 mol/L NaOH调至9.5～10.0，用蒸馏水将乙醇浓度调至55%～65%，室温静置45 min～60 min，于8000～10000 rpm离心10 min～15 min；取上清液，并加入NaCl至浓度为5%～8%，静置8 h～10 h后，于8000～10000 rpm离心10～15 min，收集沉淀，冻干，即得鲨鱼鱼肉醇溶蛋白；2）鲨鱼鱼肉醇溶蛋白的酶解：取鲨鱼鱼肉醇溶蛋白，按固液比1 g:5 mL～1 g:10 mL，加入甘氨酸—氢氧化钠缓冲液，用0.1 mol/L HCl或0.1 mol/L NaOH调节pH到9.0～1.0，得混合液；将混合物温度调制55～65℃，按照醇溶蛋白质量的0.5 %～1.0 %加入碱性蛋白酶，酶解时间3 h～4 h后，酶解液于90～95℃保温10～15min，灭酶活；将酶解液温度调至50～60 ℃，按照醇溶蛋白质量的0.6 %～0.8%加入木瓜蛋白酶，酶解时间4 h～5 h，酶解液降至室温，于8000～10000 rpm离心10～15 min，取上清液；3）鲨鱼鱼肉高F值寡肽的酶解：将上述上清液依次经超滤、活性碳吸附纯化和大孔树脂精制，得鲨鱼鱼肉高F值寡肽；其中，所述步骤2）中的甘氨酸—氢氧化钠缓冲液含0.05mol/L，pH值为 9.5；碱性蛋白酶酶活力为1.95×10⁵。