用于垃圾除臭的复合微生物制剂及其制备方法

摘要

本发明提供了一种用于垃圾除臭的复合微生物制剂及其制备方法，该复合微生物制剂呈红棕色至棕褐色液体，为发酵型酸味，pH值为3.4~4.0，有效活菌总数≥1.0×10⁹ CFU/mL，其中，该有效活菌包括酿酒酵母菌10⁵~10⁷ CFU/mL、枯草芽孢杆菌10⁶~10⁸ CFU/mL、凝结芽孢杆菌10⁶~10⁸ CFU/mL、发酵乳杆菌10⁶~10⁸ CFU/mL、布氏乳杆菌10⁶~10⁸ CFU/mL、屎肠球菌10⁵~10⁷ CFU/mL和白色链霉菌10⁴~10⁶ CFU/mL。本发明的复合微生物制剂，组成复杂，结构稳定，无毒无害无副作用，能有效抑制腐败菌、病原菌等有害微生物的繁殖和生长，消除垃圾、粪便和污水的恶臭，减少污染，改善环境。

主权项

一种用于垃圾除臭的复合微生物制剂的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)平板培养：采用划线接种法将酿酒酵母菌、枯草芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌、发酵乳杆菌、布氏乳杆菌、屎肠球菌和白色链霉菌的菌株分别接种于固体活化培养基平板上，于30℃～35℃培养36～48小时，使其复壮，形成单菌落；步骤(1)中的固体活化培养基按照下述重量百分比配制：麦芽提取粉0.3％，牛肉膏0.3％，蛋白胨0.5％，酵母膏0.3％，KH₂PO₄ 0.05％，K₂HPO₄ 0.2％，蔗糖1％，MgSO₄·7H₂O 0.025％，琼脂1.8％，其余为水，pH值为6.2～6.8，121℃灭菌20分钟，冷却备用；(2)摇瓶种子制作：用接种环将步骤(1)活化的长势良好无污染的菌种分别接种到液体活化培养基中，以500mL三角瓶30℃～35℃、150～200rpm条件下振荡培养36～48小时，得到摇瓶种子液；步骤(2)中的液体活化培养基按照下述重量百分比配制：麦芽提取粉0.3％，牛肉膏0.3％，蛋白胨0.5％，酵母膏0.3％，KH₂PO₄ 0.05％，K₂HPO₄ 0.2％，蔗糖1％，MgSO₄·7H₂O 0.025％，其余为水，pH值为6.2～6.8，121℃灭菌20分钟，冷却备用；(3)驯化培养：在5L大三角瓶内加入液体驯化培养基，接入步骤(2)的单菌株进行驯化培养，接种量为2～5％，培养条件为30℃～35℃，150～200rpm振荡培养，48～72小时；步骤(3)中的液体驯化培养基按照下述重量百分比配制：麦芽提取粉0.3％，牛肉膏0.3％，蛋白胨0.5％，酵母膏0.3％，KH₂PO₄ 0.05％，K₂HPO₄ 0.2％，蔗糖1％，MgSO₄·7H₂O 0.025％，糖蜜2％，pH值为6.2～6.8，115℃灭菌15分钟，冷却备用；(4)种子罐培养：在300L带搅拌装置的不锈钢种子罐中加入培养基250L，该培养基按照下述重量百分比配制：糖蜜10％，蛋白胨0.5％，其余为水，pH值顺其自然，75℃灭菌2小时，快速冷却至35℃后，取步骤(3)中驯化好的液体菌种进行混合接种，使步骤(3)驯化好的液体菌种重量之和与步骤(4)培养基的重量比例为1：10，其中各菌组分的重量占液体菌种重量之和的比例为：酿酒酵母菌5～10％、枯草芽孢杆菌15～25％、凝结芽孢杆菌15～20％、发酵乳杆菌10～15％、布氏乳杆菌10～15％、屎肠球菌15～25％和白色链霉菌10～20％，30～35℃发酵72～96小时，每天搅拌0.5～1小时，72小时开始检测pH值，待pH值降至3.4～4.0时即可，此时有效活菌总数≥2.0×10⁸CFU/mL；(5)发酵罐培养：在3吨带搅拌装置的不锈钢发酵罐内加入发酵培养基2.25吨，该培养基按照下述重量百分比配制：糖蜜10％，其余为水，pH值顺其自然，75℃灭菌2小时，快速冷却至35℃后，接入步骤(4)培养好的复合种子菌液，各菌组分的重量之和与步骤(5)中糖蜜的重量比例为1：1，30～35℃，72～96小时，每天搅拌0.5～1小时，72小时开始检测pH，待pH降至3.4～4.0时，即制成了用于垃圾除臭的复合微生物制剂；所述复合微生物制剂为发酵型酸味，有效活菌总数≥1.0×10⁹CFU/mL，其中，该有效活菌包括酿酒酵母菌10⁵～10⁷CFU/mL、枯草芽孢杆菌10⁶～10⁸CFU/mL、凝结芽孢杆菌10⁶～10⁸CFU/mL、发酵乳杆菌10⁶～10⁸CFU/mL、布氏乳杆菌10⁶～10⁸CFU/mL、屎肠球菌10⁵～10⁷CFU/mL和白色链霉菌10⁴～10⁶CFU/mL。