用于海豚链球菌LAMP-LFD可视化检测的引物和探针及引物和探针的应用

摘要

本发明公开了用于海豚链球菌LAMP-LFD可视化检测的引物和探针及引物和探针的应用，特点是包括三对LAMP的引物gyrB-F3、gyrB-B3；gyrB-FIP，gyrB-BIP；gyrB-LF、gyrB-LB和一条探针gyrB-HP，核苷酸序列如SEQ ID NO.1- EQ ID NO.7所示，利用上述的引物和探针，通过LAMP反应体系扩增步骤，探针杂交LAMP反应产物步骤，使用LFD检测步骤实现海豚链球菌的可视化检测并进一步用于试剂盒的制备，优点是具有更高的快捷性、特异性和灵敏度，仪器需求简单，有利于海豚链球菌的早期诊断和检测，可满足基层检测机构和现场疫源地检测的需要。

主权项

一种用于海豚链球菌LAMP‑LFD可视化检测的引物和探针，其特征在于：根据GenBank登录号为KC560771.1的海豚链球菌gyrB基因序列设计LAMP‑LFD的三对引物序列和一条探针序列，引物序列具体如下：gyrB‑F3：5’‑GAAGATGATTCCATTACCGTTG‑3’，gyrB‑B3：5’‑CTAAATCTTCTCCTACCACACC‑3’，gyrB‑FIP：5’‑TGAAACCTTATAACCGCCTCCGttttCTGCTGTTGAAACAGTCTTTAC‑3’，gyrB‑BIP：5’‑GGTCTGCATGGGGTTGGTTttttAACCCGGACATCTAACTGT‑3’，gyrB‑LF：5’‑TACCTCCAGCATGGAGAACT‑3’，gyrB‑LB：5’‑TCAGTTGTTAATGCCCTCTCAA‑3’，探针gyrB‑HP：5’‑GTTTCAGGTGGTCTGCATG‑3’，其中gyrB‑FIP的5’端为生物素标记，探针gyrB‑HP5’端为异硫氰酸荧光素标记。