一种鉴别浓度对蛋白质分子二级结构影响的检测方法

摘要

本发明公开了一种鉴别浓度对蛋白质分子二级结构影响的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)借助Langmuir-Blodgett成膜技术，将待测蛋白质分子溶液滴加于亚相的表面，观察其能否形成Langmuir单分子膜；(2)若能够生成Langmuir单分子膜，自滴加时刻起，采集表面压力π随时间的变化曲线，即实时π-t动力学曲线；若π-t动力学曲线中的π表现为一上升的，并且最终呈一稳定数值的曲线，则该蛋白质的二级结构保持良好；若π-t动力学曲线中的π表现为一下降趋势，则表明蛋白质被溶剂化严重，二级结构被破坏。本发明可用于监测蛋白质分子构象的变化，操作简单。通过实时测定不同浓度下蛋白质分子的结构变化来调控设计新型免疫药物。同时，对于指导生产不同分子构象的乳制品具有重要商用价值。

主权项

一种鉴别蛋白溶液浓度对蛋白质分子二级结构影响的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)借助Langmuir‑Blodgett成膜技术，将待测蛋白质分子溶液滴加于亚相的表面，观察其能否形成Langmuir单分子膜；所述亚相为去离子水或磷酸盐缓冲液；(2)若能够生成Langmuir单分子膜，自滴加时刻起，采集表面压力π随时间的变化曲线，即实时π‑t动力学曲线；若π‑t动力学曲线中的π表现为一上升的，并且最终呈一稳定数值的曲线，则该蛋白质的二级结构保持良好；若π‑t动力学曲线中的π表现为一下降趋势，则表明蛋白质被溶剂化严重，二级结构被破坏；所述蛋白质为牛血清白蛋白、人血清白蛋白、酪蛋白、乳白蛋白、乳球蛋白中的任意一种。