发明名称 |
一种定量测定儿茶酚-O-甲基转移酶活性的方法及其应用 |
摘要 |
一种定量测定儿茶酚-O-甲基转移酶活性的方法及其应用,属生物医药技术领域。该方法采用4-乙酸-7,8-二羟基香豆素为COMT酶的特异性探针底物,该底物可被COMT酶专一性催化生成8-甲氧基产物并在520nm处显示荧光信号,通过检测荧光强度的变化可定量测定COMT的活性。本发明不仅可用于不同来源生物样本中COMT酶活的定量评估,还可用于体外快速筛选COMT的抑制剂并评估其抑制能力。该方法可用于各类体外生物样品中COMT酶真实活力的定量评估,实现抑制剂的快速筛选及抑制能力的定量评价;可用于评价不同种属COMT及具有不同氨基酸序列的COMT突变体的催化活性,进而评估其代谢儿茶酚类药物的能力。本发明方法具有(1)高选择性,(2)廉价易得;(3)高灵敏度等优点。 |
申请公布号 |
CN105624268A |
申请公布日期 |
2016.06.01 |
申请号 |
CN201410618276.6 |
申请日期 |
2014.11.05 |
申请人 |
中国科学院大连化学物理研究所 |
发明人 |
杨凌;夏杨柳;葛广波;王平;钱星凯;窦同意 |
分类号 |
C12Q1/48(2006.01)I |
主分类号 |
C12Q1/48(2006.01)I |
代理机构 |
沈阳晨创科技专利代理有限责任公司 21001 |
代理人 |
张晨 |
主权项 |
一种定量测定儿茶酚‑O‑甲基转移酶活性的方法,其特征在于:该方法采用4‑乙酸‑7,8‑二羟基香豆素作为探针底物,该底物可被COMT酶专一性催化生成8‑甲氧基产物并在520nm处显示荧光信号,通过检测荧光强度的变化可定量测定COMT的活性;所述4‑乙酸‑7,8‑二羟基香豆素探针底物的结构式为:<img file="FDA0000601884690000011.GIF" wi="757" he="505" /> |
地址 |
116023 辽宁省大连市中山路457号 |