发明名称 神经生长因子活性定量测定方法
摘要 本发明公开了一种神经生长因子活性定量测定方法,包括以下步骤:1)将处于对数生长期的TF-1细胞用不含血清和重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子的基础培养基洗涤后重悬,获得TF-1细胞悬浮液;2)向梯度稀释的神经生长因子标准品和待测样品中分别加入所述TF-1细胞悬浮液,37℃、5%CO<sub>2</sub>孵育;然后分别加入指示剂,检测吸光度/荧光值,绘制标准曲线;3)通过标准曲线及样品的吸光度/荧光值计算待测样品的神经生长因子活性浓度。本发明的神经生长因子活性定量测定方法,具有较好的准确度和精密度。
申请公布号 CN103376248B 申请公布日期 2016.06.01
申请号 CN201210125986.6 申请日期 2012.04.26
申请人 舒泰神(北京)生物制药股份有限公司 发明人 谭淑萍;蒋立新;周志文
分类号 G01N21/64(2006.01)I 主分类号 G01N21/64(2006.01)I
代理机构 北京银龙知识产权代理有限公司 11243 代理人 钟晶;於毓桢
主权项 一种神经生长因子活性定量测定方法,包括以下步骤:1)将处于对数生长期的TF‑1细胞用不含血清和重组人粒细胞‑巨噬细胞集落刺激因子的基础培养基洗涤后重悬,获得TF‑1细胞悬浮液,获得的所述TF‑1细胞悬浮液还经过用RPMI 1640培养基在37℃、5%CO<sub>2</sub>条件下培养18‑20h;2)向梯度稀释的神经生长因子标准品和待测样品中分别加入所述TF‑1细胞悬浮液,37℃、5%CO<sub>2</sub>孵育;然后分别加入指示剂,检测吸光度/荧光值,绘制标准曲线,所述神经生长因子标准品和待测样品用RPMI1640基础培养基梯度稀释;3)通过标准曲线及样品的吸光度/荧光值计算待测样品的神经生长因子活性浓度。
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