一种检测人类Y染色体微缺失的试剂盒

摘要

本发明涉及染色体缺失检测领域，具体涉及一种检测人类Y染色体微缺失的试剂盒，其包括PCR反应液Ⅰ、PCR反应液Ⅱ、PCR反应液Ⅲ；所述PCR反应液Ⅰ包括：特异性扩增ZFX/Y、sY254、sY134和SRY位点的引物和荧光探针；所述PCR反应液Ⅱ包括：特异性扩增ZFX/Y、sY84和Y127位点的引物和荧光探针；所述PCR反应液Ⅲ包括：特异性扩增ZFX/Y、sY255和sY86位点的引物和荧光探针；本发明试剂盒通过设计不同STS的特异性荧光探针，并优化组合3管反应体系，实现一次试验即可检测Y染色体的微缺失类型，并通过ZFX/Y对不同反应体系进行有效监控。

主权项

一种检测人类Y染色体微缺失的试剂盒，其特征在于，包括PCR反应液Ⅰ、PCR反应液Ⅱ和PCR反应液Ⅲ；所述PCR反应液Ⅰ包括：特异性扩增ZFX/Y位点的引物，序列如：SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2所示；ZFX/Y位点荧光探针，序列如SEQ ID NO：3；特异性扩增Y染色体sY254位点的引物，序列如：SEQ ID NO：4和SEQ ID NO：5所示；sY254位点荧光探针，序列如SEQ ID NO：6；特异性扩增Y染色体sY134位点的引物，序列如：SEQ ID NO：7和SEQ ID NO：8所示；sY134位点荧光探针，序列如SEQ ID NO：9；特异性扩增Y染色体SRY位点的引物，序列如：SEQ ID NO：10和SEQ ID NO：11所示；SRY位点荧光探针，序列如SEQ ID NO：12；所述PCR反应液Ⅱ包括：特异性扩增ZFX/Y位点的引物，序列如：SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2所示；ZFX/Y位点荧光探针，序列如SEQ ID NO：3；特异性扩增sY84位点的引物，序列如：SEQ ID NO：13和SEQ ID NO：14所示sY84位点荧光探针，序列如SEQ ID NO：15；特异性扩增sY127位点的引物，序列如：SEQ ID NO：16和SEQ ID NO：17所示；sY127位点荧光探针，序列如SEQ ID NO：18；所述PCR反应液Ⅲ包括：特异性扩增ZFX/Y位点的引物，序列如：SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2所示；ZFX/Y位点荧光探针，序列如SEQ ID NO：3；特异性扩增sY255位点的引物，序列如：SEQ ID NO：19和SEQ ID NO：20所示；sY255位点荧光探针，序列如SEQ ID NO：21；特异性扩增sY86位点的引物，序列如：SEQ ID NO：22和SEQ ID NO：23所示；sY86位点荧光探针，序列如SEQ ID NO：24；所述ZFX/Y位点荧光探针5’端标记FAM，3’端标记BHQ；所述sY254位点荧光探针5’端标记HEX，3’端标记BHQ1；所述sY134位点荧光探针5’端标记ROX，3’端标记BHQ2；所述SRY位点荧光探针5’端标记CY5，3’端标记BHQ3；所述sY84位点荧光探针5’端标记HEX，3’端标记BHQ1；所述sY127位点荧光探针5’端标记ROX，3’端标记BHQ2；所述sY255位点荧光探针5’端标记HEX，3’端标记BHQ1；所述sY86位点荧光探针5’端标记ROX，3’端标记BHQ2；所述试剂盒的每个PCR反应液还分别包括：10×PCR Buffer，5×Q Solution，25mM MgCl₂，25mM dNTP，1U/μL UNG酶，HotStart Taq。