γ-聚谷氨酸的制备方法及保湿面霜和面霜的制备方法

摘要

一种γ-聚谷氨酸的制备方法中，采用地衣芽孢杆菌CGMCC NO.3336，经菌种活化、种子液制备、发酵罐发酵和聚谷氨酸提取后获得γ-聚谷氨酸，制备聚谷氨酸的工艺流程简单，能够大幅度的减少生产成本，同时也能减少聚谷氨酸的损失率，使得聚谷氨酸的最后产率提高；另外，该方法能够获得高分子量的聚谷氨酸，对于后续制作的保湿面霜更为有利。一种保湿面霜和面霜制备方法中，在面霜制备过程中添加γ-聚谷氨酸生物高分子材料，聚谷氨酸降解后无毒，可生物降解，对皮肤有营养成分的高端产品。聚谷氨酸可以针对各种不同肤质的皮肤进行保水保湿，可以提供比透明质酸（HA）更好的保湿效果。

主权项

一种γ‑聚谷氨酸的制备方法，采用菌株为地衣芽孢杆菌Bacillus licheniformis，该菌株已于2009年10月14日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC NO.3336；具体包括以下步骤：（1）菌种活化：将地衣芽孢杆菌的原始菌株接种在斜面培养基上，于35‑40℃培养15‑20小时之后活化2‑3次，制备成熟的斜面种子；（2）种子液的制备：将一环活化后的斜面种子接种至装有40‑60ml液体培养基的三角瓶中，35‑40℃，200‑250rpm培养15‑20小时至对数生长期；所述种子培养基组成为：K₂HPO₄ 0.5 g/L，MgSO₄·7H₂O 0.5 g/L，葡萄糖40 g/L，胰蛋白胨8 g/L pH7.2，其余为水；（3）发酵罐发酵：将步骤（2）中的种子液以3‑6%的接种量接种至发酵罐，30L发酵罐发酵培养基装液量为15L，初始发酵温度35‑38℃，罐压0.01‑0.05Mpa通风量0.5‑1.0vvm，转速450‑600rpm；当发酵液的OD₆₆₀在0.550‑0.600时，控制发酵温度30‑35℃，调节转速至330‑450rpm，通风量1.5‑2.0vvm，利用流加3mol/L氢氧化钠溶液控制pH在7.3‑7.8至发酵结束前4‑7小时；所述发酵培养基组分为：葡萄糖80 g/L，氯化钠8g/L，MgSO₄·7H₂O 1.5g/L，无水氯化钙1.5g/L，FeSO₄·7H₂O 0.02g/L，甲硫氨酸0.6g/L，精氨酸 0.8g/L，谷氨酰胺 0.5g/L，胆碱 0.31g/L，吡哆醇0.05g/L，其余为水；（4）聚谷氨酸的提取：发酵结束后15000r/min离心去菌体，然后用5倍上清液体积的乙醇，醇沉析出聚谷氨酸，然后再复溶于上清液体积的蒸馏水，利用喷雾干燥方法制备出干粉聚谷氨酸，同时将上清液用流动相稀释至γ‑聚谷氨酸的含量在1‑3g/L，通过高效液相对其分子量进行检测，分子量在 80万到220万道尔顿。