用于量化PCR产物的方法、仪器和计算机程序产品

摘要

本文件涉及核酸的解链曲线分析。根据本发明的第一方面的方法包括分析由样品测量的核酸解链曲线，所述解链曲线包含至少两种核酸解链信号和背景信号的总和信号作为温度的函数。所述方法还包括在温度-依赖性指数校正函数中优化至少一个常数，以便使在其中样品中的靶向核酸保持实质上双链的温度区域核酸解链曲线的变化最小化，并通过将所述指数校正函数应用于其中核酸的链解离的测量的解链曲线的区域，产生代表核酸解链信号的校正的核酸解链曲线。根据其他方面，本发明涉及用于精确估计解链峰面积的曲线拟合算法，和用于使校准曲线数据线性化以增加竞争性PCR测定的线性测量范围的数学转化。本发明提供了一种强有力的工具来分析含有两种或更多种具有类似但可区别的解链温度的不同核酸的PCR-扩增的样品。

主权项

使用由样品测量的测量核酸解链曲线来分析含有至少一种核酸的样品的方法，所述测量核酸解链曲线包含核酸解链信号和背景信号的总和信号作为温度的函数，所述方法包括—在温度‑依赖性指数校正函数中确定至少一个常数的最优值，以使所述测量核酸解链曲线在核酸解链转化之前的温度区域归一化，—将所述指数校正函数乘以所述测量核酸解链曲线，以生成对所述背景信号影响进行校正的校正核酸解链曲线，和—分析代表核酸解链信号的所述校正核酸解链曲线。