发明名称 一种同时定量检测水辣蓼中六种黄酮类成分的高效液相色谱方法
摘要 本发明建立了同时定量检测水辣蓼中六种黄酮类成分的高效液相色谱方法,方法选用Waters色谱柱,选定甲醇和0.4%甲酸水溶液为流动相,进行梯度洗脱,流动相的流速为1ml/min,分为3个梯度洗脱,3个梯度的甲醇和0.4%甲酸水溶液的体积比例分别为45:55,55:45,70:30,将洗脱物分别在359nm处进行紫外检测,确定各组分的浓度。本方法准确、简便,重复性好,可用于水辣蓼中芦丁、金丝桃苷、槲皮苷、槲皮素、异鼠李素和山奈酚的含量测定,为控制水辣蓼药材的质量提供依据。
申请公布号 CN103760278B 申请公布日期 2016.05.25
申请号 CN201410004738.5 申请日期 2014.01.06
申请人 广东省农业科学院动物卫生研究所 发明人 彭新宇;何立美;陈玉婷;刘洪梅;袁明贵;尹烨华;罗胜军;魏光伟
分类号 G01N30/06(2006.01)I;G01N30/60(2006.01)I;G01N30/02(2006.01)I 主分类号 G01N30/06(2006.01)I
代理机构 广州粤高专利商标代理有限公司 44102 代理人 任重
主权项 一种同时定量检测水辣蓼中六种黄酮类成分的高效液相色谱方法,其特征在于,样品制备为将水辣蓼粉碎,过20目筛,加10倍量的甲醇,称重并记录数据,超声40min后,称重并用甲醇补足至先前重量,过滤,取续滤液备用,仪器条件为选用Waters色谱柱,选定甲醇和0.4%甲酸水溶液为流动相,进行梯度洗脱,流动相的流速为1ml/min,分为3个梯度洗脱,3个梯度的甲醇和0.4%甲酸水溶液的体积比例分别为45:55,55:45,70:30,将洗脱物分别在359nm处进行紫外检测,确定各组分的浓度;所述的六种黄酮类成分为芦丁、金丝桃苷、槲皮苷、槲皮素、异鼠李素和山奈酚;所述的梯度洗脱的程序包括以下5个洗脱过程,第一阶段:初始阶段,设置流速1.00ml/min,其中甲醇和0.4%甲酸水溶液的体积比例为45:55; 第二阶段:采用流动相洗脱15min,流速1.00ml/min,其中甲醇和0.4%甲酸水溶液的体积比例为55:45; 第三阶段:采用流动相洗脱20min,流速1.00ml/min,其中甲醇和0.4%甲酸水溶液的体积比例为55:45;第四阶段:采用流动相洗脱45min,流速1.00ml/min,其中甲醇和0.4%甲酸水溶液的体积比例为70:30;第五阶段:采用流动相洗脱50min,流速1.00ml/min,其中甲醇和0.4%甲酸水溶液的体积比例为45:55。
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