| 发明名称 |
一株高效分泌D-阿洛酮糖 3-差向异构酶的基因工程菌株、构建方法及其应用 |
| 摘要 |
本发明属于生物工程技术领域，具体涉及一株高效分泌D-阿洛酮糖 3-差向异构酶的基因工程菌株及其构建方法。本发明首先获得了来源于瘤胃菌<i>Ruminococcus</i> sp. 5_1_39B_FAA的D-阿洛酮糖 3-差向异构酶基因<i>rdpe</i>，构建重组表达质粒pMA5-RDPE并转化枯草芽孢杆菌，实现了RDPE在枯草芽孢杆菌中组成型分泌表达。通过比较三个糖诱导型启动子，得到最优诱导型启动子P<i><sub>xylA</sub></i>，并明显提高了RDPE的分泌水平。通过敲除木糖利用基因<i>xylAB</i> (<i>xylA</i>和<i>xylB</i>)，阻断了枯草芽孢杆菌的木糖代谢途径，进一步提高了RDPE的分泌量，并使诱导剂木糖的最优诱导浓度由4.0%降低为0.5%。最终，采用分批补料方式，在7.5 L发酵罐中对工程菌株1A751SD-XR进行评价，RDPE的分泌水平最高可以达到95 U/mL 和2.6 g/L。 |
| 申请公布号 |
CN105602879A |
申请公布日期 |
2016.05.25 |
| 申请号 |
CN201610051547.3 |
申请日期 |
2016.01.26 |
| 申请人 |
中国科学院天津工业生物技术研究所 |
发明人 |
张大伟;陈景奇;付刚;朱玥明;孙媛霞 |
| 分类号 |
C12N1/21(2006.01)I;C12N15/61(2006.01)I;C12N15/75(2006.01)I;C12N9/90(2006.01)I;C12R1/125(2006.01)N |
主分类号 |
C12N1/21(2006.01)I |
| 代理机构 |
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代理人 |
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| 主权项 |
一种高效分泌表达D‑阿洛酮糖 3‑差向异构酶的枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）基因工程菌株1A751SD‑XR。 |
| 地址 |
300308 天津市东丽区空港经济区西七道32号 |
