一种生物抗菌剂的制备方法

摘要

本发明公开了一种生物抗菌剂的制备方法，是将生物抗体诱导源菌种分别接种到五龄蚕活体进行免疫培养，制得生物活性非致病性菌抗体菌液，再将其合并，经过干燥、加入生物激素、磁力搅拌培养获得；或是将由生物抗体诱导源菌种制备得到细菌和真菌的混合源种菌孢子悬浮液的菌种接种到五龄蚕活体上，进行抗菌培养，再与生物激素或细胞分裂素制得。所制得的抗菌剂产品对农作物可预防青枯病和枯萎病，预防发病率达80%~90%；该产品具有较强的抗菌作用及高效、广谱的抗菌优势，已完成了中试，本方法技术路线简便，产品稳定，生产成本低廉，产率可控度高，无污染、成果容易转化、便于产业化生产。

主权项

一种生物抗菌剂的制备方法，其特征在于：将生物抗体诱导源菌种分别接种到五龄蚕活体进行免疫培养，制备各生物抗体诱导源菌种的生物活性非致病性菌抗体菌液，再将其合并，经过干燥、加入生物激素、磁力搅拌培养获得，具体步骤如下：（1）制备青枯菌的生物活性非致病性菌抗体菌液：在常温、湿度75~80%条件下，取消毒五龄蚕活体中部1/2丝腺处皮下注射接种菌浓为10⁸ cfu/ml的青枯菌菌悬液0.01mL，进行48h的蚕活体免疫培养后，将培养后的蚕活体以组织粉碎机进行组织粉碎，遮光条件下磁力搅拌培养72h，加温至100℃下恒温10‑15min，过滤，过滤液静置12‑14h，获得青枯菌的生物活性非致病性菌抗体菌液；（2）制备辣椒疫霉菌的生物活性非致病性菌抗体菌液：在常温、湿度75~80%条件下，取消毒五龄蚕活体中部1/2丝腺处皮下注射接种菌浓为10⁶ cfu/ml的辣椒疫霉菌游动孢子菌悬液0.01mL，进行48小时的蚕活体免疫培养后，将培养后的蚕活体以组织粉碎机进行组织粉碎，遮光条件下磁力搅拌培养72h，加温至60℃下恒温10‑15min，过滤，过滤液静置12‑14h，获得辣椒疫霉菌的生物活性非致病性菌抗体菌液；（3）制备黄瓜枯萎病菌的生物活性非致病性菌抗体菌液：在常温、湿度75~80%条件下，取消毒五龄蚕活体中部1/2丝腺处皮下注射接种菌浓为10⁶ cfu/ml的黄瓜枯萎病菌孢子菌悬液0.01mL，进行48小时的蚕活体免疫培养后，将培养后的蚕活体以组织粉碎机进行组织粉碎，遮光条件下磁力搅拌培养72h，加温至100℃下恒温10‑15min，过滤，过滤液静置12‑14h，获得黄瓜枯萎病菌的生物活性非致病性菌抗体菌液；（4）制备枯草芽孢杆菌的生物活性非致病性菌抗体菌液：在常温、湿度75~80%条件下，取消毒五龄蚕活体中部1/2丝腺处皮下注射接种菌浓为10⁹cfu/ml的枯草芽孢杆菌菌悬液0.01mL，进行48小时的蚕活体免疫培养后，将培养后的蚕活体以组织粉碎机进行组织粉碎，遮光条件下磁力搅拌培养72h，加温至100℃下恒温10‑15min，过滤，过滤液静置12‑14h，获得枯草芽孢杆菌的生物活性非致病性菌抗体菌液；（5）将上述制备得到的青枯菌、辣椒疫霉菌、黄瓜枯萎病菌、枯草芽孢杆菌的生物活性非致病性菌抗体菌液进行合并，在红外灯下将蚕活体组织粉碎液干燥至水分含量为70%~80%后，投入50kg反应釜中，并加入生物激素，磁力搅拌培养120h，40℃红外灯光照下干燥，即得；其中，所述生物激素为地塞米松磷酸钠或地塞米松醋酸酯，生物激素与蚕活体组织粉碎液质量的用量比例为1‑1.2：1000。