牛樟芝扦插枝的培育方法

摘要

本发明公开了牛樟芝扦插枝的培育方法，是采用海绵液体培养基先增殖培养牛樟芝继代培养材料，再转接培养至液体培养基，重复多次后转接至添加有琼脂粉的固体培养基中生根培养成眠，即得到牛樟芝组培苗。本发明的有益效果为：本发明提供的牛樟芝扦插枝的培育方法，具有以下优点：1、牛樟芝组培材料能充分吸收到营养成份，提高品质及产量，增殖率可达5-6倍，存活率可达80%；2、海绵可重复利用，且液体培养基分装配制比较方便，瓶子等用具容易清洗干净；3、省去购买琼脂粉的费用，降低生产成本。

主权项

牛樟芝扦插枝的培育方法，其特征在于，包括以下步骤：1）制备海绵液体培养基：选择圆柱形的耐高温过滤海绵，直径与透气盖螺纹瓶底部大小一致，海绵厚度为1cm，在海绵上面均匀开有15个口径为0.8cm，深度为0.5cm大小的V形孔，将海绵块平放在培养瓶底部，开孔的一面朝上，直接用自来水配制药品并经定容调好pH值即成液体培养基，适量分装到放有海绵的培养瓶中，使营养液刚刚浸泡完海绵块即可；所述液体培养基的组分组成为PDB培养基+MY培养基；2）培养基的灭菌：将步骤1）得到的分装好的海绵液体培养基经高压灭菌，灭菌温度为121‑123℃，灭菌压力为0.11‑0.13MP，灭菌时间为22‑25分钟，得到灭菌后培养基；3）培养材料的接种：无菌状态下，将牛樟芝培养材料分切成单芽分别插种到灭菌后的海绵液体培养基的V形孔中，进行快速增殖培养，培养时间为30‑35天，增殖率为5‑6倍；4）增殖材料的转接：将步骤3）中增殖后的材料挟出分切再接种到新鲜的液体培养基中继续进行增殖培养；此后当培养到30‑35天时，再次将材料进行分切更换到新鲜的液体培养基中进行增殖培养；5）生根培养：将步骤4）得到的增殖培养后的牛樟芝增殖材料转接到一定数量后，将其分切成单株转接到添加有琼脂粉的固体培养基中进行生根培养，经过2～3个月培养炼苗后即得到牛樟芝组培苗移植株。