一种利用分子标记选育洋葱雄性不育系和保持系的方法

摘要

本发明公开了一种利用分子标记选育洋葱雄性不育系和保持系的方法：利用特异性引物(如SEQ ID NO.1～6所示)，通过PCR实验检测单个洋葱球核质基因型，筛选获得不育株和保持株洋葱球，实现两系配套。本发明根据Ms等位基因侧翼序列(F1890和S1887)与洋葱细胞质雄性不育特异序列mt472，设计多套引物，通过科学实验开发了基于多重PCR的分子标记检测系统及检测试剂盒。该检测系统能够通过一次PCR实验区分洋葱6种核质育性类型，然后利用此检测系统，从开放授粉群体内直接选育不育系和保持系，实现两系的一次性配套。该多重PCR检测系统的开发为洋葱核质互作雄性不育核质基因型的准确、快速鉴定具有重要意义。

主权项

一种利用分子标记选育洋葱雄性不育系和保持系的方法，其特征在于：步骤如下：(1)筛选符合育种目标的OP群体单个洋葱球；(2)提取待检测洋葱样本的总DNA；(3)通过PCR实验检测单个洋葱球核质基因型，筛选获得不育株和保持株的洋葱球；所述PCR实验检测过程中，所用的特异性引物如下：NF898U:5'GCAATACACAGCTTCTAGCTGAATT 3'，如SEQ ID NO.1所示；NF898D:5'AACACACACACAGAGTGAGAAATTTTATATA 3'，如SEQ ID NO.2所示；NS628U:5'TCTGTGTGTGTGTGTAATTTCTCTG 3'，如SEQ ID NO.3所示；NS628D:5'CGGAAGATTAATATTTTGCGTATACAT 3'，如SEQ ID NO.4所示；mt345U:5'TTGTTCTCAAGCAGATTCCGC 3'，如SEQ ID NO.5所示；mt345D:5'CAGTAGGACCAAACCGAGAGTGA 3'，如SEQ ID NO.6所示；若PCR实验检测结果为：不存在898bp的片段，存在628bp和345bp的片段，则该待检测洋葱样本的基因型为S(msms)，该待检测洋葱样本为不育株；若PCR实验检测结果为：不存在898bp和345bp的片段，存在628bp的片段，则该待检测洋葱样本的基因型为N(msms)，该待检测洋葱样本为保持株；(4)将上述筛选得到的洋葱球定植于网室内；网室内葱球开花后混合授粉，从不育株获得不育系，从保持株获得保持系。