一种拓朴异构酶Ⅱ杂化纳米花的制备方法及应用

摘要

本发明公开了一种拓朴异构酶Ⅱ杂化纳米花的制备方法及应用，用超纯水溶解CuSO₄，配成CuSO₄溶液，再配制拓朴异构酶Ⅱ-PBS缓冲液，反应后将反应产物用超纯水反复超声冲洗，冷冻干燥得固体粉末。该拓朴异构酶Ⅱ杂化纳米花用于分离多穗金粟兰中拓朴异构酶抑制作用的抗肿瘤有效成分的提取，其具体步骤包括多穗金粟兰粗提液的制备、固相萃取柱分离以及微型固相吸头萃取小柱分离多穗金粟兰粗提液中的拓朴异构酶抑制有效成分，结合LC/MS分析确定有效成分的结构。本发明制备的拓朴异构酶Ⅱ杂化纳米花形貌为花型且单分散，粒径5μm左右，适合作为萃取填料，对拓朴异构酶抑制成分具很好的识别性能，可用于中药提取液中拓朴异构酶抑制成分的靶向筛选、分离和纯化。

主权项

一种拓朴异构酶Ⅱ杂化纳米花的制备方法，其特征在于，具体制备步骤如下：（1）用超纯水溶解CuSO₄，配成浓度为115～125mmoL/L的CuSO₄溶液；（2）配置PBS缓冲液使其pH值为7.4，将20mL的上述CuSO4溶液加到3L的拓朴异构酶Ⅱ‑PBS缓冲液，在24～26℃下反应3天，将反应产物用超纯水反复超声5～8次，冲洗4～6次，冷冻干燥得固体粉末，即得拓朴异构酶Ⅱ杂化纳米花。