使用微生物转谷氨酰胺酶进行赖氨酸特异性化学酶法蛋白质修饰

摘要

本发明涉及方法和试剂，其用于采用化学酶法微生物转谷氨酰胺酶-介导的反应、用官能化肽的具有赖氨酸残基的蛋白质的位点选择性修饰当中。官能化的蛋白质可以用于研究或治疗用途。

主权项

修饰蛋白质的方法，包括：提供具有至少一个赖氨酸残基的靶标蛋白质；在微生物转谷氨酰胺酶存在下，将靶标蛋白质与具有式R¹‑(Leu)_x‑Gln‑(Gly)_y‑(A‑W‑B‑R²)_z的修饰化合物接触以形成经修饰的蛋白质；其中x是0或1；y是0或1；z是0或1；R¹选自：乙酰基,其中R⁴选自‑H，‑N₃，和W选自：C₁‑C₆线性或支化的烷基或具有约40至约80,000amu分子量的聚乙二醇；A是不存在或选自‑O‑，‑NH‑，和‑S‑；B是不存在或选自‑O‑，‑C(O)‑，‑NH‑，‑C(O)NH‑，‑NHC(O)‑，‑NHC(O)O‑，‑OC(O)NH‑，‑OC(O)O‑，‑C＝N(OH)‑，‑S(O₂)‑，‑NHS(O₂)‑，‑S(O₂)NH‑，‑S(O)‑，‑NHS(O)‑，‑S(O)NH‑；‑C(O)O‑，‑OC(O)‑，‑S‑，＝NH‑O‑，＝NH‑NH‑和＝NH‑N(C₁‑C₂₀烷基)‑；R²选自：脂肪酸，线性或支化的C₁‑C₃烷基‑N₃，环辛炔基，荧光团，多糖，‑CH(OCH₃)₂，各n是独立地选自0至6的整数；各Q选自H和NO₂。