一种高得率酶法辅助提取二苯乙烯苷的制备方法

摘要

本发明公开了一种高得率酶法辅助提取二苯乙烯苷的制备方法，属于二苯乙烯苷制备技术领域。本发明以何首乌为原料，先经高压均质再利用复合酶剂酶解以提高提取率，再通过微波醇提后，旋蒸浓缩，最后干燥研磨，从而得到高得率酶法辅助提取二苯乙烯苷的制备方法。该方法操作简便，在提取的过程中无需添加大量有机溶液，避免了有机物残留，而且操作环境温和，避免了高温导致二苯乙烯苷氧化和糖苷链断裂的问题，最终使得二苯乙烯苷提取率达95％以上，纯度高达99％以上，适合大规模生产应用。

主权项

一种高得率酶法辅助提取二苯乙烯苷的制备方法，其特征在于具体制备步骤为：（1）称取1～2kg何首乌洗净后晾干放入气流粉碎机中，以3m³/min空气耗量和0.70～0.80MPa空气压力进行粉碎，将得到何首乌粉末按固液比为1:2倒入蒸馏水中，放置在磁力搅拌机上，以200～300r/min转速搅拌混合10～20min，得到何首乌粉末悬浊液；（2）将上述得到的何首乌粉末悬浊液移入高压均质机，以2.0～3.0L/h流速和100～110MPa压力进行高压均质处理5～8min，量取1.0～1.2L均质后的何首乌混合液装入体积为2L的陶瓷酶解罐中，加入酶解底物总质量0.2～0.5%复合酶剂，用浓度为0.5mol/L醋酸溶液调节pH至4.0～5.0，放置在恒温箱中于35～45℃下密封酶解60～80min；（3）酶解完成后过滤分离去除滤渣，得到酶解液，将酶解液装入管式超滤装置中，利用10万分子量的醋酸纤维素膜作为超滤膜，并在0.1～0.2MPa的驱动压力和20～30℃的条件下进行超滤，收集滤液；（4）将上述超滤后的滤液和无水乙醇按体积比为1:1进行混合，放入微波提取仪中，以200～250W功率加热至40～50℃，保温微波醇提1～2h，醇提完成后将混合液放入旋转蒸发器，加热升温至45～55℃，旋蒸回收无水乙醇并浓缩处理直至混合液体积变为原体积的1/8～1/6，得到浓缩液；（5）将上述得到的浓缩液放入真空冻干机，以1℃/min速率进行降温直至冷阱温度达到‑40～‑30℃，冷冻干燥30～40min，干燥后再放入玛瑙研钵中研磨成粉并过200目标准筛，包装，即得二苯乙烯苷。