发明名称 一种用于鉴定耐缺铁苹果砧木的方法
摘要 本发明公开了一种用于鉴定耐缺铁苹果砧木的方法。该方法包括如下步骤:1)对待测苹果砧木和标准耐缺铁苹果砧木分别进行缺铁处理,提取总RNA;2)采用针对耐缺铁基因探针对总RNA进行斑点杂交;3)用ImageScannner扫描,并用ImageMaster分析,得到所述待测苹果砧木和所述标准耐缺铁苹果砧木中所述耐缺铁基因的表达量;4)若所述待测苹果砧木中所述耐缺铁基因的表达量不低于所述标准耐缺铁苹果砧木,则所述待测苹果砧木为或候选为耐缺铁苹果砧木。实验证明,本发明方法具有成本低廉和高效的优点,并且克服了耐缺铁苹果砧木常规选育的局限性,在基因水平上进行选育,为基因表达标记辅助选择育种奠定良好基础。
申请公布号 CN104195223B 申请公布日期 2016.05.18
申请号 CN201410230957.5 申请日期 2014.05.28
申请人 中国农业大学 发明人 韩振海;朱明涛;张新忠;王忆;吴婷;贾文锁;许雪峰
分类号 C12Q1/68(2006.01)I 主分类号 C12Q1/68(2006.01)I
代理机构 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 代理人 关畅
主权项 一种用于鉴定或辅助鉴定耐缺铁苹果砧木的方法,包括如下步骤:(1)对待测苹果砧木植株和标准耐缺铁苹果砧木植株分别进行缺铁处理后,提取总RNA;(2)采用针对耐缺铁基因的探针对步骤(1)所得的总RNA进行斑点杂交;(3)采用软件ImageScannner对步骤(2)获得的杂交结果进行扫描,并用软件ImageMaster进行分析,分别得到所述待测苹果砧木植株和所述标准耐缺铁苹果砧木植株中所述耐缺铁基因的表达量;(4)根据步骤(3)的结果,按照如下方法确定所述待测苹果砧木是否为耐缺铁苹果砧木:若所述待测苹果砧木植株中所述耐缺铁基因的表达量不低于所述标准耐缺铁苹果砧木植株中所述耐缺铁基因的表达量,则所述待测苹果砧木为或候选为耐缺铁苹果砧木;反之,则所述待测苹果砧木不为或候选不为耐缺铁苹果砧木;所述耐缺铁基因为如下5个基因中的至少1个:MxIrt1基因、MxCS1基因、MxHA7基因、MxFIT1基因和MxRD3基因;所述标准耐缺铁苹果砧木为小金海棠。
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