发明名称 一种测定大豆对草甘膦耐性的方法及应用
摘要 本发明公开了一种测定大豆对草甘膦耐性的方法及应用。本发明所提供的测定大豆对草甘膦耐性的方法,涉及一种不同于现有技术的向待测植株施用除草剂的方法,包括如下步骤:取种子萌发出土后待测大豆植株,将草甘膦溶液的原液或稀释液滴加到所述待测大豆植株的绿色组织,特别是下胚轴弯曲外侧,所述点施的剂量为1μl。本发明的点施法克服了传统除草剂大田(温室)喷施与分子检测的缺点和不足。可用于子叶出土植物,特别是大豆,对草甘膦耐性或抗性的定量与定性测定,反映不同品种间的耐性差异,亦可用于筛选高抗转基因植株,将转基因植物对除草剂抗性水平加以分级。
申请公布号 CN104280536B 申请公布日期 2016.05.18
申请号 CN201410409514.2 申请日期 2014.08.19
申请人 中国农业科学院作物科学研究所 发明人 邱丽娟;刘明;郭勇;李脉泉;张宪丽
分类号 G01N33/48(2006.01)I;C12N15/87(2006.01)I;A01H5/00(2006.01)I 主分类号 G01N33/48(2006.01)I
代理机构 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 代理人 关畅
主权项 一种测定大豆对草甘膦半抑制浓度的方法,包括如下步骤:(1)用无菌水将草甘膦溶液的原液按照10倍比梯度稀释,得到4个稀释倍数的草甘膦溶液:10倍,100倍,1000倍,以及10000倍;所述草甘膦溶液的原液的稀释倍数记为1倍;(2)取种子萌发出土2天内的待测大豆植株,分为实验组和对照组,分别按照如下进行点施处理:实验组:取步骤(1)中制备的不同稀释倍数的草甘膦溶液1μl,分别滴加于所述待测大豆植株的同一绿色组织;对照组:将1μl无菌水替代所述实验处理组中的所述不同稀释倍数的草甘膦溶液,其余同所述实验处理组;(3)在步骤(2)点施处理后,当所述对照组中的所述待测大豆植株生长到第一个三出复叶展开时,测量所述实验组中经所述不同稀释倍数的草甘膦溶液处理的所述待测大豆植株的株高,以及所述对照组中所述待测大豆植株的株高;用所述实验组的所述株高比上所述对照组的所述株高,所得比值记为相对株高;(4)根据所述草甘膦溶液的不同稀释倍数的对数值与步骤(3)获得的对应的所述相对株高,绘制线性回归曲线,得到线性回归方程;(5)根据步骤(4)所得的线性回归方程,计算当所述相对株高为0.5时,对应的所述草甘膦溶液的稀释倍数的对数值,进而计算得到相应的所述草甘膦溶液的稀释倍数,即为半抑制浓度。
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