一种利用连续培养过程生产牛樟芝菌体的方法

摘要

本发明属于发酵技术领域，特别涉及一种利用连续培养过程生产牛樟芝菌体的方法。该方法在传统液体培养法的基础上，通过加入一定的载体使牛樟芝菌体生长其上，待菌体生长到一定的程度，在无菌条件下刮下菌体，更换新的培养基继续培养，以实现牛樟芝菌体的连续培养，最终利用该发明中培养方法，以孔径为2-8mm的化纤网布为菌体生长层，以孔径为2-8mm的刚性网状材料为支撑层，单次培养牛樟芝可获得菌体干重9-12g/L，连续培养5批后可获得菌体干重42-50g/L。该方法是一种利用连续培养过程获得牛樟芝菌体的新方法。

主权项

一种通过连续培养生产牛樟芝菌体的方法，包括如下步骤：(1)扩大培养：利用挖块接种法，将牛樟芝菌种接种至新的固体培养基中，扩大培养；(2)制备孢子悬液：无菌水洗下经扩大培养后的新菌落上的孢子，制备孢子悬液；(3)制备载体：载体由菌体生长层和支撑层组成，以化纤类大孔材质为菌体生长层，以刚性网状材质为支撑层，将菌体生长层固定在支撑层上，放入液体培养基中作为培养牛樟芝菌的载体；(4)单次培养：向放置了载体的液体培养基中接种孢子悬液，为使菌丝体均匀分布于载体上，置于180‑220rpm，25‑35℃的恒温摇床中培养2‑4天，大量菌体均匀附着于载体上生长，无菌条件下，倒掉残留培养基，加入去离子水冲洗菌体3‑4次，抽滤除去去离子水，获取菌体；(5)连续培养：按上述步骤(4)方法培养2‑4天后，无菌条件下倒掉残留培养基，刮下菌体，加入无菌水冲洗菌体3‑4次，倒干无菌水，加入新的灭菌后的液体培养基，为减小培养中的离心力，加速菌体生长，连续培养过程置于110‑160rpm，25‑35℃的恒温摇床中培养2‑4天，重复此步骤即可实现牛樟芝菌的连续培养；(6)完成单次培养或连续培养后，获取牛樟芝菌体，烘干，测定菌体干重。