抗草甘膦EPSPS基因的筛选方法及其应用

摘要

本发明涉及基因工程领域，具体而言，涉及一种抗草甘膦EPSPS基因的筛选方法，该方法以含有草甘膦的培养基对微生物进行高通量筛选，可在短时间内筛选、分离和分析抗草甘膦EPSPS基因，不用对分离的个别菌株筛选，较传统方法目标性强，操作简便，节约了大量的人力和物力。本发明还提供了一种基于所述抗草甘膦EPSPS基因的筛选方法筛选到的抗性基因的应用，将这些抗性基因在转入农作物后其草甘膦抗性可在短时间内得到评估，另外也可以快速培育抗草甘膦植物品种。

主权项

一种抗草甘膦EPSPS基因的筛选方法，其特征在于，包括如下步骤：1)、将含有草甘膦抗性微生物的多种微生物在含有草甘膦的抗性的筛选培养基中进行筛选培养，得到抗性菌种，并对其纯化培养获得单克隆；2)、以所述单克隆的基因组为模板扩增该单克隆的EPSPS基因的开放阅读框序列，将扩增产物连入质粒中并于细菌中进行原核表达，得到重组菌株；3)、对重组菌株的草甘膦抗性进行验证，获得抗草甘膦EPSPS基因。