发明名称 哺乳动物表达载体
摘要 本发明提供了用于在哺乳动物细胞中表达至少一种目的多肽的载体核酸,包括:(a)至少一个用于表达目的多肽的表达盒(POI);(b)包含哺乳动物选择性标记基因的表达盒(MSM);(c)包含哺乳动物的可扩增的选择性标记基因的表达盒(MASM);其中所述表达盒(POI)5’侧翼连接表达盒(MASM),表达盒(MSM)位于表达盒(POI)的3’,而且其中表达盒(MASM)、(POI)和(MSM)以相同的5’至3’方向排列。本发明还提供了包含所述载体的宿主细胞和用于使用各自的宿主细胞制备多肽的方法。
申请公布号 CN101903523B 申请公布日期 2016.05.18
申请号 CN200880122117.X 申请日期 2008.12.18
申请人 诺华股份有限公司 发明人 H-P·科诺普夫;B·威尔姆斯
分类号 C12N15/79(2006.01)I 主分类号 C12N15/79(2006.01)I
代理机构 北京市中咨律师事务所 11247 代理人 黄革生;林柏楠
主权项 一种适用于在哺乳动物细胞中表达至少一种目的多肽的载体核酸,包括:(a)至少一个适用于表达目的多肽的表达盒POI,其中所述表达盒包含至少一个启动子或者启动子/增强子元件;(b)包含哺乳动物选择性标记基因的表达盒MSM,其中所述哺乳动物选择性标记基因是抗生素抗性基因并且其中所述表达盒包含至少一个启动子或者启动子/增强子元件;(c)包含哺乳动物的可扩增的选择性标记基因的表达盒MASM,其中所述表达盒包含至少一个启动子或者启动子/增强子元件;其中所述表达盒POI的5’侧翼连接表达盒MASM,表达盒MSM位于表达盒POI的3’,而且其中表达盒MASM、POI和MSM以相同的5’至3’方向排列,并且‑其中所述载体为环状的,而且在所述环状载体中所述表达盒MSM排列在表达盒POI的3’端,而且其中表达盒MASM排列在表达盒MSM的3’端,并且其中所述环状载体包含用于线性化所述载体的唯一线性化限制性酶切位点,其中所述线性化限制性酶切位点位于表达盒MSM和MASM之间,或‑其中所述载体通过位于表达盒MSM和MASM之间的唯一线性化限制性酶切位点而得到线性化。
地址 瑞士巴塞尔