CRY报告基因载体的构建方法及其应用

摘要

本发明涉及基因工程领域，具体提供了一种CRY报告基因载体的构建方法及其应用。其是将Rabin8蛋白中与Rab8特异性结合的氨基酸序列RBD（如SEQ ID No.1所示）依次连入真核表达载体pECFP和pEYFP，构成CFP-RBD-YFP序列，得到报告基因载体CRY。本发明利用报告基因载体CRY的报告基因所编码的蛋白定位及识别Rab8^GDP，并对细胞内游离状态的Rab8^GDP进行半定量分析和定位分析，从而特异性追踪细胞内Rab8^GDP的变化。

主权项

一种CRY报告基因载体，其特征在于，所述载体的构建方法包括以下步骤：(1)将Rabin8蛋白中与Rab8特异性结合的氨基酸序列RBD连入真核表达载体pECFP，构成CFP‑RBD序列；(2)将上述CFP‑RBD序列进行克隆，再连入真核表达载体pEYFP，构成CFP‑RBD‑YFP序列，得到报告基因载体CRY；所述Rabin8蛋白中与Rab8特异性结合的氨基酸序列RBD如SEQ ID No.1所示。