一种检测凝血酶的电化学发光生物传感器及其制备方法

摘要

本发明公开了一种检测凝血酶的电化学发光生物传感器及其制备方法，该方法包括：玻碳电极预处理；在预处理的玻碳电极上涂覆二茂铁功能化石墨烯；制备Ru(bpy)₃²⁺标记的凝血酶适配体溶液；将涂覆修饰后的电极在标记后的适配体溶液中培育一段时间，即得到所述生物传感器。由于二茂铁对Ru(bpy)₃²⁺具有信号淬灭作用，该传感器处于“光信号关闭”状态。当将其浸入凝血酶检测液中后，传感器上的适配体会与凝血酶发生特异性结合，因此发生构象变化，从二茂铁石墨烯表面脱吸附，导致二茂铁光淬灭基团与Ru(bpy)₃²⁺发光基团分离，淬灭效应减弱，传感器转化为“光信号开启”状态，从而实现对凝血酶的特异性检测。本发明的生物传感器检测凝血酶时稳定性好，灵敏度高，操作简单方便。

主权项

一种检测凝血酶的电化学发光生物传感器的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）对玻碳电极进行预处理；（2）将浓度为1.0～2.0 mg·mL^‑1的二茂铁功能化石墨烯溶液涂覆到所述预处理后的玻碳电极表面，形成二茂铁功能化石墨烯修饰玻碳电极；（3）制备浓度为1～10μM的Ru(bpy)₃²⁺标记的凝血酶适配体溶液；（4）将所述步骤（2）所得到修饰玻碳电极浸入所述步骤（3）得到的溶液中培育40～50 min，即得到所述的电化学发光生物传感器；其中，所述凝血酶适配体的序列为5’‑NH₂‑(CH₂)₆‑TACATGTGG TTG GTGTGGTTGG‑3’。