细菌超氧化物歧化酶及其制备方法

摘要

本发明涉及一种细菌超氧化物歧化酶及其制备方法，所述细菌超氧化物歧化酶由保藏编号为CCTCC M 2015633的格氏乳球菌(Lactococcus garviea)发酵培养制备得到，包括格氏乳球菌(Lactococcus garviea)的活化、种子液的制备、发酵培养以及超氧化物歧化酶的制备的步骤。该方法制备得到的超氧化物歧化酶产量高、活性好、稳定性好，制备过程简单、成本低。

主权项

一种细菌超氧化物歧化酶的制备方法，其特征在于，该细菌超氧化物歧化酶包括酶液和酶粉两种形式，由保藏编号为CCTCC M 2015633的格氏乳球菌(Lactococcus garviea)发酵培养制备得到，包括以下步骤：(1)格氏乳球菌的活化：将格氏乳球菌(Lactococcus garviea)在琼脂‑M17培养基上活化；(2)格氏乳球菌种子液的制备：将活化后的格氏乳球菌(Lactococcus garviea)接种于液体培养基中培养得到格氏乳球菌(Lactococcus garviea)种子液；(3)格氏乳球菌的发酵培养：将格氏乳球菌(Lactococcus garviea)种子液接种于发酵培养基中发酵培养后，离心收集发酵湿菌体直接用于下一步超氧化物歧化酶的制备，或者将离心收集的发酵湿菌体冻干得到冻干菌粉；(4)超氧化物歧化酶的制备：将步骤(3)收集的发酵湿菌体或者冻干菌粉，悬浮于pH为7.2‑8.5的磷酸缓冲液中，加入溶菌酶裂解2～24h，离心，将上清液调节pH为4.0～5.6，冰冷放置1‑3h，离心除沉淀，即得细菌超氧化物歧化酶酶液；或将酶液冻干即得细菌超氧化物歧化酶酶粉。