一种检测溶液中羟基自由基浓度的方法

摘要

一种检测溶液中羟基自由基浓度的方法，它涉及一种检测羟基自由基的方法。本发明的目的是要解决现有方法检测溶液中羟基自由浓度存在检测费用昂贵，检测时间长，定量效果不佳，可重复性差和测试精度低的问题。步骤：一、标准曲线的绘制；二、回归方程的获得；三、根据标准曲线获得回归方程：A＝0.00476C(mol·L^-1)+0.01271(r＝0.99951)计算溶液中羟基自由基的浓度。本发明首次通过添加FeSO₄成功抑制了萃取剂对坚牢蓝BB盐的萃取，大大削弱坚牢蓝BB盐对检测结果的影响，提高检测精度，检测误差在5％以内，且实验可重复性极高。本发明可获得一种检测溶液中羟基自由基浓度的方法。

主权项

一种检测溶液中羟基自由基浓度的方法，其特征在于一种检测溶液中羟基自由基浓度的方法具体是按以下步骤完成的：一、标准曲线的绘制：将甲基亚磺酸钠溶液分别加入到编号为①到⑥的六个容器中，其中①号加入摩尔浓度为25μmol·L^‑1的甲基亚磺酸钠溶液1mL，②号加入摩尔浓度为50μmol·L^‑1的甲基亚磺酸钠溶液1mL，③号加入摩尔浓度为75μmol·L^‑1的甲基亚磺酸钠溶液1mL，④号加入摩尔浓度为100μmol·L^‑1的甲基亚磺酸钠溶液1mL，⑤号加入摩尔浓度为150μmol·L^‑1的甲基亚磺酸钠溶液1mL；⑥号加入摩尔浓度为250μmol·L^‑1的甲基亚磺酸钠溶液1mL；然后将编号为①到⑥的容器置于暗处，分别向编号为①到⑥的容器中加入摩尔浓度为2mmol·L^‑1的坚牢蓝BB盐，其中①号加入1.25mL；②号加入2.50mL，③号加入3.75mL，④号加入5.00mL，⑤号加入7.50mL；⑥号加入12.5mL；再在室温下反应10min，得到编号为①到⑥的含有重氮砜产物的混合溶液；再分别向编号为①到⑥的含有重氮砜产物的混合溶液中加入FeSO₄及3mL甲苯/丁醇混合萃取剂，萃取5min，去除下层液，得到编号为①到⑥的3mL上层萃取液；再分别向编号为①到⑥的3mL上层萃取液中加入1mL吡啶，得到编号为①到⑥的待测萃取液；用1cm比色皿，丁醇试剂空白作参比，测定425nm处编号为①到⑥的待测萃取液的吸光度；以吸光度为纵坐标，以甲基亚磺酸钠浓度为横坐标，绘制标准曲线；步骤一中所述的FeSO₄的物质的量与编号为①到⑥的含有重氮砜产物的混合溶液的体积比为(200mmol～500mmol):1L；步骤一中所述的甲苯/丁醇混合萃取剂中甲苯与丁醇的摩尔比为2:1；二、回归方程的获得：根据步骤一的标准曲线获得回归方程：A＝0.00476C+0.01271，r＝0.99951；其中A为吸光度；C为甲基亚磺酸钠浓度，单位为μmol·L^‑1；三、溶液中羟基自由基的测定：①取含有羟基自由基的溶液1mL，再向1mL含有羟基自由基的溶液中加入0.002g～0.02g二甲基亚砜，得到含甲基亚磺酸的溶液；②将含甲基亚磺酸的溶液置于暗处，加入1.25mL～12.5mL摩尔浓度为2mmol·L^‑1的坚牢蓝BB盐溶液，室温下反应10min，得到含有重氮砜产物的混合溶液；③向含有重氮砜产物的混合溶液中加入FeSO₄，再使用3mL甲苯/丁醇混合萃取剂对含有重氮砜产物的混合溶液进行萃取，萃取时间为5min，去除下层液，得到上层液；使用丁醇/水饱和溶液将上层液清洗1次～2次，再在转速为500r/min～1000r/min的条件下离心2min～3min，再去除离心后的下层液，得到离心后的上层液；向离心后的上层液中加入吡啶，再用1cm比色皿，丁醇试剂空白作参比，在425nm处测定溶液的吸光度，根据步骤二中回归方程计算溶液中羟基自由基浓度；步骤三③中所述的FeSO₄的物质的量与含有重氮砜产物的混合溶液的体积比为(200mmol～500mmol):1L；步骤三③中所述的甲苯/丁醇混合萃取剂中甲苯与丁醇的摩尔比为2:1；步骤三③中所述的吡啶的体积与离心后的上层液的体积比为1:3。