主权项 |
一种植物叶片中琥珀酰丙酮的检测方法,其特征在于,该方法步骤如下:a、浸取:取叶片,液氮研磨后置于过量的pH值为11‑13、摩尔浓度为10mol/L的NaOH溶液或KOH溶液中,超声提取10‑15min,超声频率为35‑45MHZ,再于冰浴下浸泡1‑2小时,浸泡液在5‑7℃下离心,过滤;b、异恶唑化:于上述滤液中,按每20ml滤液加2.8‑3.2ml质量体积浓度为10g/L的盐酸羟胺水溶液的比例,加入盐酸羟胺水溶液,在55‑65℃下水浴40‑80min,常温下离心,过滤;c、转移溶剂:按每20ml滤液加2.4ml摩尔浓度为12mol/L的浓盐酸的比例,于b步骤所得滤液中加入浓盐酸,再按每20ml滤液加10mL、8mL、5mL色谱纯级的乙酸乙酯的比例,依次加入乙酸乙酯萃取,合并有机相;d、硅烷化:将上述有机相旋转蒸发,蒸发后的溶液体积是每4g叶片原料得1‑3ml,入氮气吹干仪吹近干即保证不被完全吹干,按每4g叶片原料加175‑225ul硅烷化试剂的比例加入硅烷化试剂,于60‑70℃下水浴85‑95min,;再入氮气吹干仪吹干后,按每4g叶片原料加40‑120ul色谱纯级乙酸乙酯的比例加入色谱纯级乙酸乙酯溶解样品瓶中固体,进行GC‑MS分析,并与琥珀酰丙酮标准品配制成的溶液在该GC‑MS分析条件下得到的琥珀酰丙酮标准品的出峰时间和特征峰进行比较。 |