一种从发酵液中分离提取4-羟基异亮氨酸的方法

摘要

一种从发酵液中分离提取4-羟基异亮氨酸的方法，该方法首先通过双膜即微滤膜、超滤膜分离系统错流过滤去除发酵液中的菌体、大部分蛋白和色素，然后通过阳离子交换柱除去酮戊二酸等杂酸、粉末活性炭脱色、真空浓缩、冷冻结晶、离心收集产品、干燥成品操作步骤，得到纯度97.0％以上的4-羟基异亮氨酸结晶，收率达到65％以上。本发明采用微滤和超滤双膜过滤菌体蛋白，菌体蛋白去除彻底，过滤液澄清透明；采用阳离子离子交换工艺，高效去除难分离的酮戊二酸等杂质。

主权项

一种从发酵液中分离提取4‑羟基异亮氨酸的方法，该技术从发酵液中分离提取4‑羟基异亮氨酸，首先将4‑羟基异亮氨酸发酵液通过双膜即微滤膜、超滤膜分离系统错流过滤去除发酵液中的菌体、大部分蛋白和部分色素，然后通过阳离子交换柱除去杂酸酮戊二酸、粉末活性炭脱色、真空浓缩、冷冻结晶、离心收集产品和干燥成品操作步骤，得到纯度97.0％以上的4‑羟基异亮氨酸结晶，收率达到65％以上，具体步骤如下：a、将4‑羟基异亮氨酸发酵液经活菌灭活，用盐酸调节pH为4.0，进入微滤膜分离系统进行微滤，得到去除菌体的4‑羟基异亮氨酸微滤液以及菌体蛋白；b、将经a步得到澄清的4‑羟基异亮氨酸过滤液泵入超滤膜过滤器，对过滤液进行除蛋白和脱色处理，操作温度为20‑50℃，操作压力为0.01‑0.1MPa，得到4‑羟基异亮氨酸过滤液；c、将b步获得的过滤液上732阳离子交换树脂吸附，吸附饱和后用去离子水反洗，之后采用2％‑7％的氨水洗脱，收集pH为7.0‑10.5的4‑羟基异亮氨酸高流分洗脱液；d、将c步获得高流分洗脱液加入洗脱液重量的0.05％‑2％的活性炭脱色，温度30‑60℃，搅拌脱色20‑30min，过滤获得4‑羟基异亮氨酸脱色液；e、将d步获得的脱色液用盐酸调pH为7.0‑8.0后进行减压蒸发至原体积液的10％‑20％，获得含有大量4‑羟基异亮氨酸晶体的悬混液；f、将e步得到的4‑羟基异亮氨酸晶体的悬混液放置于4℃结晶2‑10h，过滤，获得4‑羟基异亮氨酸晶体。