利用实时荧光定量PCR技术获取多糖类中药对家禽免疫功能增强作用中间信息的方法

摘要

利用实时荧光定量PCR技术获取多糖类中药对家禽免疫功能增强作用中间信息的方法，包括如下步骤：提取动物血液样品的基因组RNA；基因组RNA反转录为cDNA；在荧光定量PCR反应体系中分别加入β-actin引物、IL-2引物、cDNA以及荧光染料反应液，混匀，进行PCR扩增；根据荧光实时定量PCR专用仪对结果进行分析，根据IL-2基因和β-actin的Ct值，通过相对Ct法即2^–ΔΔCt法，来计算IL-2基因mRNA的相对表达量。本发明操作简单，得到的IL-2基因mRNA的相对表达量为多糖类中药对家禽免疫功能增强作用的中间信息，能够辅助评价多糖类中药对家禽免疫功能增强作用。

主权项

利用实时荧光定量PCR技术获取多糖类中药对家禽免疫功能增强作用中间信息的方法，其特征在于：包括如下步骤：(1)提取家禽血液样品的基因组RNA；(2)将步骤(1)所得的基因组RNA反转录为cDNA；(3)在荧光定量PCR反应体系中分别加入β‑actin引物、IL‑2引物(即白介素‑2引物)、步骤(2)得到的cDNA以及荧光染料反应液，混匀，进行PCR扩增；(4)PCR扩增结束后，根据荧光实时定量PCR专用仪对结果进行分析，根据IL‑2基因和β‑actin的Ct值，通过相对Ct法即2^–ΔΔCt法，来计算IL‑2基因mRNA的相对表达量。