一种大鳞副泥鳅与泥鳅杂交种的鉴别方法

摘要

本发明公开了一种大鳞副泥鳅与泥鳅杂交种的鉴别方法，包括以下步骤：（1）通过大鳞副泥鳅和泥鳅的两种微卫星标记进行相互种间扩增，找到大鳞副泥鳅和泥鳅的特异性标记；（2）以待鉴别泥鳅的DNA为模板，以步骤（1）中的3个标记分别进行PCR扩增，获得3种PCR扩增产物；（3）分别对3种PCR扩增产物进行凝胶电泳分析，当PCR扩增产物电泳图谱显示被测样品有Pda71、Mac287和Mac375标记的三条带时，确定该被测样品为杂交种泥鳅。本发明不仅能够快速有效地对泥鳅和大鳞副泥鳅的杂交种泥鳅进行鉴别，还能够鉴别杂交种泥鳅的父本和母本是泥鳅还是大鳞副泥鳅。

主权项

一种大鳞副泥鳅与泥鳅杂交种的鉴别方法，其特征在于包括以下步骤：(1)通过大鳞副泥鳅和泥鳅的两种微卫星标记进行相互种间扩增，找到大鳞副泥鳅和泥鳅的特异性标记，大鳞副泥鳅的标记是Pda71，泥鳅的标记是Mac287和Mac375；(2)提取待鉴别泥鳅的DNA，并以该DNA为模板，以步骤(1)中的3个标记分别进行PCR扩增，获得3种PCR扩增产物；(3)分别对步骤(2)中的3种PCR扩增产物进行凝胶电泳分析，当PCR扩增产物电泳图谱显示被测样品只有Pda71标记的一条带时，该被测样品为大鳞副泥鳅；当PCR扩增产物电泳图谱显示被测样品只有Mac287、Mac375标记的两条带时，该被测样品为泥鳅；当PCR扩增产物电泳图谱显示被测样品有Pda71、Mac287和Mac375标记的三条带时，该被测样品为杂交种泥鳅；(4)提取经步骤(3)中确认为杂交种泥鳅的DNA，并以该DNA为模板，以线粒体标记进行PCR扩增，获得PCR扩增产物，再对该扩增产物进行凝胶电泳分析，当PCR扩增产物电泳图谱显示被测样品有285bp的一条带时，确定该被测样品为泥鳅♀×大鳞副泥鳅♂的杂交子代；当PCR扩增产物电泳图谱显示被测样品有214bp的一条带时，确定该被测样品为大鳞副泥鳅♀×泥鳅♂的杂交子代。