分泌抗马铃薯Y病毒单抗杂交瘤细胞株及其单抗应用

摘要

本发明公开了一种分泌抗马铃薯Y病毒(PVY)单抗杂交瘤细胞株及其单抗的应用。利用差速离心法提纯的PVY病毒粒子为抗原免疫BALB/c小鼠，经细胞融合、筛选、克隆，获得1株能稳定传代并分泌抗PVY单抗的杂交瘤细胞株3B2，其保藏号为CGMCC No.12001。该细胞株分泌单抗腹水间接ELISA效价达10^-7，抗体类型及亚类为IgG1、kappa轻链，该单抗与30kDa的PVY外壳蛋白有特异反应。利用3B2单抗建立检测作物上PVY的ACP-ELISA、dot-ELISA和Tissue blot-ELISA检测方法，其中ACP-ELISA和dot-ELISA方法检测病叶的灵敏度分别达到1:81920和1:10240倍稀释(w/v,g/mL)。抗PVY单抗的制备及其检测方法的建立为该马铃薯病毒病的诊断和检测、流行病学分析及科学防控提供物质和技术支撑。

主权项

一种分泌抗马铃薯Y病毒单抗杂交瘤细胞株3B2，其特征在于能分泌抗马铃薯Y病毒单抗，所述的杂交瘤细胞株3B2于2016年1月7日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC No.12001。