一种低凝固温度琼脂糖的制备方法

摘要

本发明公开了一种低凝固温度琼脂糖的制备方法，包括如下步骤：(1)将琼脂糖溶于去离子水中，配制成琼脂糖溶液；(2)上述琼脂糖溶液自然冷却至60～83℃后，向其中加入硼氢化钠的氢氧化钠溶液进行还原反应；(3)加入氢氧化钠溶液进行碱化处理；(4)迅速冷却，边搅拌边缓慢滴加环氧乙烷，进行衍生化反应；(5)加热，边搅拌边滴加乙酸溶液调节溶液的pH值；(6)边搅拌边将热异丙醇加入，进行醇沉分级；(7)过滤、粉碎、洗涤若干次，得滤饼；(8)经干燥、粉碎、过筛，即得所述低凝固温度的琼脂糖。本发明对普通的琼脂糖进行化学改性和分级纯化，制备得到的琼脂糖具有低凝固温度、低熔化温度和高凝胶强度等特点，是DNA分离提取的理想生物材料。

主权项

一种低凝固温度琼脂糖的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：(1)将琼脂糖于80～95℃下溶于去离子水中，配制成1.0～10.0wt％的琼脂糖溶液；(2)上述琼脂糖溶液自然冷却至60～83℃后，向其中加入硼氢化钠的氢氧化钠溶液进行还原反应，反应过程中观察溶液的颜色变化，当颜色由浅绿色变为无色透明液体时，终止还原反应；(3)向步骤(2)所得溶液中加入浓度为2.0～6.0mol/L的氢氧化钠溶液进行碱化处理，该氢氧化钠溶液的添加量为2～20mL/g琼脂糖；(4)将步骤(3)的溶液迅速冷却至0～10℃，边搅拌边于0.8～1.2h内缓慢滴加环氧乙烷溶液至环氧乙烷在溶液中的浓度为1.0～5.0wt％，再搅拌反应0.5～2.0h；(5)将步骤(4)所得的溶液加热至60～70℃，边搅拌边滴加乙酸溶液调节溶液的pH值至7.0～8.0；(6)边搅拌边将40～50℃的热异丙醇加入到步骤(5)的溶液中，然后静置1.0～3.0h进行醇沉分级；(7)将步骤(6)所得的物料冷却至30～40℃后进行过滤，得到沉淀物，用60～65％体积浓度的异丙醇水溶液浸没后进行搅拌分散，再以异丙醇洗涤若干次，脱水得滤饼；(8)将上述滤饼进行40～60℃的恒温干燥6.0～12.0h后，再粉碎、过筛，即得所述低凝固温度的琼脂糖，该琼脂糖的熔化温度为60～65℃，凝固温度26～31℃，凝胶强度大于250g/cm²。