利用海蟹共生烟曲霉生产烟曲霉文丙的方法及其培养基

摘要

本发明涉及一种用于发酵培养海蟹共生烟曲霉（CY018，Aspergillus fumigatus）生产生物碱类选择性免疫抑制剂-烟曲霉文丙（Fumigaclavine C，通称FC）的方法及其培养基。配制1000ml所述培养基所需的成分包含：糖蜜50-150g/L、蔗糖40-80g/L、硝酸钠（NaNO₃）2-5g/L、磷酸氢二钾（K₂HPO₄）0.5-1.5g/L、氯化钾（KCl）0.25-1g/L、七水硫酸镁（MgSO₄•7H₂O）0.25-1g/L、硫酸亚铁（FeSO₄）0.005-0.02g/L、硫酸锌（ZnSO₄）0.005-0.02g/L、硫酸铜（CuSO₄）0.001-0.01g/L、色氨酸0.5-1.5g/L，以自来水溶解，并定容至1000ml，再以盐酸调节pH值至4.0-4.5，将所获得的培养基以121℃灭菌15-30分钟。本发明的培养基成分简单，成本低廉，制备操作方便，不需特殊设备，用于发酵培养海蟹共生烟曲霉生产烟曲霉文丙，能显著提高烟曲霉文丙的产量。

主权项

一种利用海蟹共生烟曲霉生产烟曲霉文丙的方法，其特征在于，所述方法所用的每升培养基的成分包含有糖蜜50‑150g/L、蔗糖40‑80g/L、硝酸钠2‑5g/L、磷酸氢二钾0.5‑1.5g/L、氯化钾0.25‑1g/L、七水硫酸镁0.25‑1g/L、硫酸亚铁0.005‑0.02g/L、，硫酸锌0.005‑0.02g/L、硫酸铜0.001‑0.01g/L、色氨酸0.5‑1.5g/L，以自来水溶解；该方法所用菌种为海蟹共生烟曲霉Aspergillus fumigatus CY018，所述方法包括以下操作步骤：a.将冷冻保存的海蟹共生烟曲霉解冻后，在固体平板培养基中央进行点样并活化培养4‑6天，获得新鲜固体平板培养基，固体平板培养基每隔30天重新活化一次；b.从新鲜的海蟹共生烟曲霉的固体平板培养基中挖取1块琼脂块，接种至种子培养基中发酵培养3‑4天，获得新鲜种子液；c.取所述新鲜种子液，按5‑20％(v/v)的接种量接入上述培养基，以28±2℃、130±20rpm摇床振荡培养3‑5天后，将转速降为0rpm，静置培养7‑10天，获得发酵液；以及d.取所述发酵液进行抽提、萃取、纯化，获得烟曲霉文丙。