一种无花果粗多糖的制备及纯化方法与用途

摘要

本发明是一种无花果粗多糖的制备方法，其步骤如下：取无花果干若干剪碎，用95%乙醇回流去脂及色素，抽滤后残渣用70%乙醇回流去小分子杂质；然后取残渣，作为无花果多糖的提取原料；取残渣，用水作为溶剂在微波条件下提取后，抽滤，取滤液用旋转蒸发浓缩至100Ml，加95%乙醇后静置24h，离心后取沉淀，沉淀用Sevage法除去蛋白后，冷冻干燥，即得无花果粗多糖；提取时，残渣和水的料液比1：20-23；微波功率为550W，提取时间为13min，醇沉用乙醇量为提取液体积的3.50-3.60倍。本发明还公开了无花果粗多糖的纯化方法及用途。

主权项

一种无花果粗多糖的制备方法，其特征在于，其步骤如下：取无花果干若干剪碎，用95％乙醇回流去脂及色素，抽滤后残渣用70％乙醇回流去小分子杂质；然后取残渣，作为无花果多糖的提取原料；取残渣，用水作为溶剂在微波条件下提取后，抽滤，取滤液旋转蒸发浓缩至100mL，加95％乙醇后静置24h，离心后取沉淀，沉淀用Sevage法除去蛋白后，冷冻干燥，即得无花果粗多糖；提取时，残渣和水的料液比1：22.45；微波功率为550W，提取时间为13min，醇沉用乙醇量为提取液体积的3.55倍；其纯化方法步骤如下：(1)离子交换纤维素DEAE‑52经蒸馏水充分溶胀后，用0.5M的NaOH和0.5M的HCl交替处理数次后再用蒸馏水反复洗涤，直至其pH至6进行装柱，采用2.0cm×30cm常压砂芯玻璃柱，装好的离子柱再用蒸馏水进行平衡24小时待用；(2)取无花果粗多糖以蒸馏水配制成质量浓度为1％的溶液；然后将无花果多糖溶液上已经平衡好的DEAE‑52离子交换柱，上样体积为5mL，用0‑1M NaCl 200mL以50mL/h的流速过柱，用自动部分收集器以每管5mL的量进行收集，以苯酚－硫酸比色法测定每管的总糖浓度作洗脱曲线，根据洗脱曲线收集相同组份，于40℃减压浓缩并冷冻干燥得到无花果多糖；(3)Sephacryl S‑300HR经蒸馏水轻柔洗涤数次、减压脱气后装柱，采用1.6cm×80cm柱，以蒸馏水平衡；将步骤(2)得到的无花果多糖溶于去离子水，配制浓度为15mg/mL的多糖溶液，上已经平衡好的Sephacryl S‑300HR分子筛柱，上样量为2mL，用去离子水以6mL/h的流速进行洗脱；用分部收集器进行收集，用苯酚－硫酸比色法测每管的总糖浓度，再根据洗脱曲线合并相同组份，去盐透析后，40℃减压浓缩后冷冻干燥；如上操作反复进行纯化若干次冷冻干燥得到无花果多糖纯品。