三疣梭子蟹丝氨酸蛋白酶基因的应用

摘要

本发明属于分子生物学技术领域，具体的说是一种三疣梭子蟹丝氨酸蛋白酶（PtcSP）基因的应用。三疣梭子蟹丝氨酸蛋白酶PtcSP基因编码蛋白的重组表达产物可作为制备免疫增强剂、饲料添加剂、防腐剂、保鲜剂、蛋白酶药物或抗菌药物中的应用。本发明在药物开发和饲料添加剂生产等方面具有潜在的应用价值，为三疣梭子蟹的病害防治和基因辅助选育奠定基础。

主权项

一种三疣梭子蟹丝氨酸蛋白酶基因编码蛋白的重组表达产物在制备免疫增强剂、饲料添加剂、防腐剂、保鲜剂、蛋白酶药物或抗菌药物中的应用；三疣梭子蟹丝氨酸蛋白酶基因编码蛋白的重组表达产物为，利用带有限制性酶切位点的引物P1和P2通过PCR扩增三疣梭子蟹丝氨酸蛋白酶基因编码区片段；再将pET30a载体与上述PCR扩增产物经BamHI和XhoI双酶切，连接后转化表达菌株BL21DE3‑pLysS；表达菌株进行诱导培养，超声波破碎处理菌体收获重组蛋白，经TALON柱纯化、复性后得到具有活性的三疣梭子蟹丝氨酸蛋白酶；所述P1为5'GGATCCCAAGCTCGCCAGTGTTCATCTG3'；P2为5'CTCGAGCTAGGGCTTGATGCTGCTTG 3'。