摘要 |
Un método para generar anticuerpos monoclonales, que comprende las etapas de: a) crear una biblioteca de secuencias de ADNc, comprendiendo la creación las etapas de: (i) aislar el ARNm de linfocitos aislados procedentes de un sujeto hospedador que se ha inmunizado con un antígeno; (ii) transcribir de manera inversa el ARNm a ADNc; (iii) amplificar las secuencias de ADNc del anticuerpo diana; y (iv) secuenciar las secuencias de ADNc del anticuerpo diana; y b) analizar la frecuencia de las secuencias de ADNc del anticuerpo diana, que comprende: (i) comparar las frecuencias relativas de las secuencias de ADNc del anticuerpo diana antes y después de la exposición al antígeno, donde las secuencias de ADNc del anticuerpo diana que tienen una frecuencia significativamente mayor después de la exposición al antígeno se identifican como secuencias de anticuerpo candidatas; o (ii) comparar las frecuencias relativas de las secuencias de ADNc del anticuerpo diana en dos o más veces después de la exposición al antígeno, donde las secuencias de ADNc del anticuerpo diana que tienen una frecuencia significativamente menor en momentos posteriores se identifican como secuencias de anticuerpo candidatas. |